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洋槐花中总黄酮物质提取工艺研究 　　摘要：采用传统浸提法，以乙醇为溶剂，考察溶剂浓度、提取温度、料液比、提取时间和提取次数对洋槐花总黄酮物质提取率的影响，并在单因素实验的基础上，通过正交试验，确定了洋槐花总黄酮物质的提取工艺。结果表明，乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间及提取次数对洋槐花总黄酮物质的提取率均有影响，优化的洋槐花总黄酮物质的提取工艺为：料液比1：25，乙醇浓度70%，提取温度60℃，提取时间90min，提取次数为三次。 　　关键词：洋槐花 乙醇 总黄酮物质 提取率 　　中图分类号：TS201 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2013）18-0007-03 　　洋槐又名刺槐，在我国分布极广，且生长迅速，资源极为丰富[1]。洋槐花（Sophora Japonica. L），性清凉，具有清热解毒、舒张血管、改善血液循环、防止血管硬化、降低血压等作用，属于药食两用花卉。洋槐花营养丰富，含有丰富的维生素、蛋白质、氨基酸、糖分和动物生长所必需的多种微量元素[1]，据测定每l00g鲜洋槐花中，含蛋白质3.1g，脂肪0.7g，碳水化合物15g，粗纤维2.2g，灰分1.2g，钙83mg，磷69mg，铁36mg，胡萝卜素0.04mg，核黄素0.18mg，尼克酸6.6mg，维生素C30mg，含热量330kJ[2]。此外，还含有丰富的黄酮类化合物[3]。黄酮类化合物广泛存在于许多植物中，具有多样生物活性，尤其在治疗心血管疾病方面有强心、抗心肌缺血、扩张血管、降压、抗心律失常、降血脂、抗动脉粥样硬化等多种作用，能有效抑制血小板聚集和防治血栓形成。 　　目前，从植物中提取黄酮类化合物已成为国内外研究的的热门课题。本文采用乙醇溶液提取洋槐花中的黄酮，从多个因素方面确定从洋槐花中提取总黄酮物质的最佳工艺。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料和试剂 　　1.1.1 原料 　　洋槐花：采摘于山西襄汾张槐村 　　1.1.2 化学试剂 　　无水乙醇、芦丁、硝酸铝、六偏磷酸钠、亚硝酸钠、氢氧化钠、蒸馏水 　　1.2 试验仪器与设备（见图1） 　　1.3 试验方法 　　1.3.1 原料的预处理 　　洋槐花经精选，除杂，清洗，干燥，粉碎过60目筛后放入干燥器内备用。 　　1.3.2 总黄酮物质的测定原理 　　利用芦丁与Al生成黄??络合物，然后在最大波长下建立吸光度与浓度的标准工作曲线，由此可计算样品中总黄酮物质的含量[4]。 　　1.3.3 标准曲线的建立 　　采用NaNO2-Al（NO）3-NaOH光度法测定黄酮含量。精密称取芦丁标准品10mg，置50ml容量瓶中，加70%的乙醇溶解并稀释到刻度，配制成质量浓度为0.2mg/ml的芦丁标准液。精取配制好的芦丁标准液0.0、0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml分别装入10ml容量瓶中，加5% 亚硝酸钠0.4ml，放置6min后加入10%硝酸铝溶0.4ml，放置6min，再加入4%的氢氧化钠溶液4ml，加水至刻度，摇匀，放置15min后在波长505nm处进行比色测定，将测定结果吸光度y与芦丁浓度x做线性回归，得方程为y =8.6551x+0.0111，R2=0.9983。 　　1.4 洋槐花中总黄酮物质的提取工艺流程 　　洋槐花→除杂→清洗→干燥→粉碎→浸提→过滤→合并滤液→测吸光度→得总黄酮物质的提取率 　　1.5 总黄酮的提取工艺的研究 　　1.5.1 单因素影响试验 　　分别研究了乙醇浓度、提取温度、提取时间、料液比、提取次数对总黄酮物质提取率的影响。 　　1.5.2 正交试验法选取最佳工艺 　　选择较显著的4个因素设计3水平，做L9（3）4正交试验[12]，以得到总黄酮物质提取的最佳工艺条件，试验指标为总黄酮物质的提取率。 　　2 结果与讨论 　　2.1 单因素影响试验 　　经单因素试验结果表明：提取洋槐花中总黄酮类物质的最佳乙醇浓度为60%，最佳提取温度选择60℃，最佳料液比为1：25，最佳提取时间选择80min，最合理的提到次数为3次 　　2.2 正交试验法选取最佳工艺 　　在单因素试验的基础上，选择对乙醇浓度（A）、温度（B）、料液比（C）、提取时间（D）进行正交优化试验，以得到从洋槐花中提取总黄酮物质的最佳工艺条件。因素水平表见表1，正交试验设计及试验结果见表2、表3。 　　2.3 结果分析 　　由表2极差分析可看出，影响洋槐花中总黄酮物质提取因素作用的主次顺序为BACD，即料液比乙醇浓度提取温度提取时间。经方差分析可知，料液比具有显著性，乙醇浓度和提取温度具有显著性，提取时间具有不显著性。可确定各因素的最优水平为B2A3C2D3，即在料液比1：25，乙醇浓度70%，提取温度60℃，提取时间90