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水煎煮法提取葛根总黄酮动力学模型适用性研究 　　摘要 该文围绕本实验室参与推导的中药通用提取动力学模型，建立了适当试验以及数据处理方法，并以葛根总黄酮为测定指标，以水煎煮法提取葛根中总黄酮对该模型的适应性进行了研究。研究发现，葛根总黄酮质量浓度的自然对数值随时间、溶剂倍量值的自然对数变化成良好线性关系，通过计算，拟合，成功地建立了水煎煮法提取葛根总黄酮的动力学模型，并对该模型进行了验证，拟合度良好，偏差能够很好地控制在工业生产要求的范围内，说明该方法的模型适应性良好。但方程校正因子仍需进一步研究。 　　关键词 提取动力学模型；葛根；模型适应性；总黄酮 　　收稿日期 2013-01-22 　　基金项目 国家自然科学基金面上项目 　　通信作者 *倪健，教授，博士生导师，E-mail：njtcm@263.net 　　葛根Puerariae Radix具有解肌退热，透疹，生津止渴，升阳止泻的功效，是中医临床常用的一种传统中药，因此许多中成药工艺研究中都涉及到了葛根，如葛根芩连注射剂[1]、葛心痛降脂缓释片[2]、脑得生滴丸[3]。提取是中药制药的重要步骤[4]，中药制剂的质量和疗效在很大程度上取决于中药提取过程，对于细胞结构完整的中药材来讲更是如此。因此，如果能够建立葛根水煎煮提取动力学模型，就可以起到提高提取工艺筛选效率和提取物质量并增加其可重复性的作用。通过不断的校正与优化该模型最终达到指导科研与工业生产的作用。 　　葛根中主要含有黄酮类成分如葛根素[5]，大豆苷，大豆苷元，葛根素-7-木糖苷等[6]，现在葛根中药效物质的研究对象也多集中在黄酮类成分，因此建立一个葛根中总黄酮的水煎煮提取动力学模型是具有现实意义的。 　　1 通用中药水煎煮提取动力学模型的建立推导 　　韩林辛等[7]根据Fick′s 第一扩散定律，希格比传质穿透模型理论，推导出了总方程。 　　若只改变煎煮时间，对（1-1）取对数可得公式（1-2）。 　　若只改变溶剂倍量，对（1-1）取对数可得公式（1-3）。 　　根据以上公式，通过合理地试验设计，就可以初步建立葛根水煎煮提取动力学模型。 　　1.1 方程中参数的解释 　　CB为提取液中目标成分的质量浓度，单位为g·L-1。M为溶剂倍量，单位为mL·g-1。σ1对于性状不同的饮片代表不同的含义，对于葛根这种近似为正方体形的药材，其代表饮片的1个边长，单位是μm。f1为方程中的1个固定参数，与药材中目标成分的含量有关。R为干药材的吸溶剂率。n与扩散系数有关，值为负。 　　1.2 关于模型的解释 　　在最初的模型推导中，由（1-1）还可得公式（1-4）： 　　经过深入分析与讨论发现，该方程中的参数σ1并不是机械地指代粒度，如果药材饮片或者颗粒呈现不同形态，其具体指代的意义也将发生变化。例如饮片为类似正方体时其指代边长，如果为球体时，其指代该球体的半径。 　　考虑到葛根纤维性较强，粉碎后可能造成含量不均匀以及工业生产中葛根通常不进行粉碎处理，此次研究中固定研究对象为葛根饮片，对其进行均匀取样并测定。 　　2 试验研究 　　2.1 材料 　　Tu1810紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；ZDHW电热套（北京中兴伟业仪器有限公司）；DZKW-4水浴锅（北京中兴伟业仪器有限公司）。葛根素对照品（120627，四川维克奇生物有限公司）；乙醇为分析纯（北京化工厂），水为蒸馏水。葛根药材（20100273420120406，北京同仁堂有限责任公司）由北京中医药大学中药鉴定系刘春生教授鉴定，符合2010年版《中国药典》的规定。 　　2.2 葛根总黄酮含量测定方法 　　2.2.1 测定波长的确定 取药材粉末2 g（过3号筛），加水200 mL回流提取30 min，滤过，取提取液100 μL，用水稀释至10 mL，在190～800 nm测定溶液的紫外吸收图谱，结果表明与葛根素对照品的紫外图谱相似，在250 nm处均有最大吸收。故选定250 nm作为测定波长。 　　2.2.2 标准曲线的测定[8] 精密称取对照品2.41 mg，加入蒸馏水溶解并定容至10 mL，摇匀，制得质量浓度为0.241 g·L-1的葛根素对照溶液。精密吸取50，70 μL，0.1，0.12，0.15，0.2，0.25，0.3，0.4，0.45，0.5，0.7 mL，分别置于10 mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，以蒸馏水做空白对照，在250 nm处测吸光度，结果表明，在0.001 205～0.016 87 g·L-1吸光度（Y）与葛根素质量浓度（X）呈良好的线性关系，其回归方程为Y=80.689X-0.002 2，R2=0.999 9。 　　2.2.3 精密度试验 取质量浓度为0.241 g·L-1的对照品溶液30