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CIP2A在慢性粒细胞白血病中表达及意义 　　【摘要】 目的：探讨蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子在慢性粒细胞白血病各期中的表达及意义。方法：采用免疫化学SP法测定CIP2A在对照组及CML各期中的表达。结果：CIP2A在CML-AP/BP组的表达显著高于对照组和CML-CP组（P0.05）；CIP2A在CML-AP/BP未缓解组明显高于缓解组（P　　【关键词】 蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子； 慢性粒细胞白血病； 免疫组化 　　BCR/ABL融合基因的形成是慢性粒细胞白血病（CML）发生的重要机制， 针对BCR/ABL融合基因靶向治疗药物酪氨酸激酶的应用使得CML疗效明显改善。但是一旦急变，患者往往数月之内死亡。关于CML急变的机制仍不明确。因此，寻找新的CML急变的相关基因对于揭示CML发生急变的分子机制和发现治疗的新靶点具有重要的意义。蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子（cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A，CIP2A）是最近被识别的一种癌蛋白[1]，其在白血病中的表达情况及其意义报道很少。本研究采用免疫组化方法，检测CIP2A在CML各期中的表达，初步探讨CIP2A在CML中的表达及意义。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 选择笔者所在医院2009年7月-2011年6月门诊及住院CML患者43例，男24例，女19例，年龄15～75岁，平均54.7岁，慢性期27例（CML-CP组），加速期3例和急变期13例（CML-AP/BP组），加速期和急变期16例化疗后完全缓解11例（缓解组），未缓解5例（未缓解组）。对照组为非恶性液病患者19例，男12例，女7例，年龄19～71岁，平均50.2岁。CML诊断及疗效参照张之南主编《血液病诊断及疗效标准》[2]。 　　1.2 检测方法 用免疫组织化学法检测骨髓单个核细胞CIP2A，CIP2A多克隆抗体（Santa Crus公司产品），生物素标记的羊抗小鼠二抗及SP免疫标记试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司产品）。髂后或髂前上嵴穿刺取骨髓，用淋巴细胞分离液（比重1.077）分离骨髓单个核细胞并涂片，干燥后用新鲜配制的丙酮溶液于室温下固定30 min，用磷酸盐缓冲液（0.01 mol/L，pH 7.4）漂洗3次；0.1% Triton 100通透10 min，再用PBS漂洗3次，然后根据试剂说明书进行操作。每一批实验均设阳性及空白对照，阳性对照采用胃癌切片（由试剂公司提供），空白对照以PBS代替一抗进行检测。 　　1.3 结果判定 细胞胞浆着棕黄色颗粒状弥漫或局灶分布者为阳性细胞。根据阳性所占的比例及显色程度，参照1997年全国免疫组化技术诊断标准化专题研讨会意见，对阳性细胞进行积分：细胞质和（或）核内见浅黄色颗粒，明显高于背景底色，阳性颗粒所占细胞面积的比例70%为3分。每片统计500个细胞中的阳性细胞数，计算表达率及阳性积分。每片统计500个细胞中的阳性细胞数及阳性细胞积分，并换算为每100个细胞的平均阳性率和平均积分。 　　1.4 统计学处理 应用SPSS 13.0统计软件进行统计学处理，计量资料采用（x±s）进行表示，多组间检验采用方差分析，组间两两比较采用q检验；两组间均数比较采用独立样本t检验，P0.05）。见表1。 　　2.2 CIP2A在CML-AP/BP患者化疗一疗程后缓解组及未缓解组骨髓单个核细胞表达的比较 CIP2A阳性产物呈棕黄色细颗粒状弥散于细胞质内，未缓解组CIP2A的表达显著高于缓解组（P0.05），提示CIP2A可能在CML急变过程中发挥了一定的作用，其分子机制尚需进一步阐明。 　　在一些实体肿瘤中，CIP2A蛋白的高表达与预后不良相关[1，3-4，9]。Khanna等[10]报道CIP2A在胃癌组织的过度表达与胃癌总体生存率降低相关。说明CIP2A可能是一个的独立预后因素。本研究发现标准方案化疗一疗程未缓解组CIP2A阳性率及积分显著高于一疗程缓解组（P 　　参考文献 　　[1] Vita M，Henriksson M.The myconcoprotein as a therapeutic target for human cancer[J].Semin Cancer Biol，2009，16（4）：318-330. 　　[2] 张之南，沈悌.血液病诊断及疗效标准[M].第3版.北京：科学出版社，2007：134-136. 　　[3] Come C，Laine A，Chanrion M，et al.CIP2A is associatedwith human breast cancer aggressivity[J].Clin Cancer Res，2009，15（16）：5092-5100. 　　[4] L