酶法提取酸浆宿萼中可溶性膳食纤维工艺优化.docVIP

酶法提取酸浆宿萼中可溶性膳食纤维工艺优化 　　摘要：以酸浆（Physalis alkekengi）宿萼为试验材料，采用酶法酶解淀粉、蛋白质、脂肪等物质，提取可溶性膳食纤维，运用单因素试验和正交试验对酸浆宿萼中的可溶性膳食纤维提取的最佳工艺进行优化。结果表明，在综合考虑产物提取率、纯度和成本的前提下，最佳酶解提取工艺为在pH 6.5、酶解温度50 ℃、酶解12 h、醇沉30 min的条件下，原材料中添加纤维素酶5×104 U/g，α-淀粉酶5×102 U/g，木瓜蛋白酶1.2×103 U/g，在此条件下得到的提取率为6.5%。 　　关键词：酸浆（Physalis alkekengi）宿萼；可溶性膳食纤维；提取工艺；酶用量 　　中图分类号：S641.4；Q-31 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）05-1142-03 　　酸浆（Physalis alkekengi）俗名红姑娘、灯笼草等，为茄科植物，具有耐寒、抗病等特点，是一种野生性极强的植物，具有独特的药用价值和丰富的营养价值[1]。 　　膳食纤维是一种复杂混合物，主要包括纤维素、半纤维素、果胶及亲水胶体物质，还包括木质素、抗性淀粉、抗性糊精、改性纤维素、黏质、寡糖以及少量蜡质、角质和软木脂等[2]。膳食纤维分为水溶性膳食纤维和水不溶性膳食纤维两大类，其中水溶性膳食纤维主要由一些胶类等亲水胶体物质和部分半纤维素组成。水溶性膳食纤维的主要功能是减少血液中的胆固醇，调节血糖，从而降低心脏病的发生机率，改善并治疗糖尿病以及肥胖症等[2]。目前，水溶性膳食纤维的应用越来越受到重视，被广泛运用于食品行业。有关酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的提取报道的较少，赵成萍等[1]利用碱法提取了酸浆宿萼中可溶性膳食纤维，碱法操作简单，成本较低，但腐蚀性大，不利于保护环境。而周静峰等[3]对浒苔中可溶性膳食纤维进行提取，发现酶法较化学法提取的可溶性膳食纤维产出量高，且产物的持水力、膨胀力都优于碱法。进一步研究发现，酶法提取的浒苔可溶性膳食纤维可作为高品质膳食纤维及理想的食品添加剂[4]。目前，有关酶法提取酸浆宿萼中可溶性膳食纤维的研究鲜见报道，本研究利用酶法提取酸浆宿萼中的可溶性膳食纤维，采用正交试验优化提取工艺，以期为酸浆中可溶性膳食纤维的推广应用提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与仪器 　　酸浆宿萼购自山东省烟台市万民阳光药店；α-淀粉酶（10×103 U/g）、纤维素酶（5×104 U/g）、木瓜蛋白酶（8×105 U/g）、脂肪酶（2×104 U/g）均购自江苏锐阳生物科技有限公司；95%乙醇（分析纯）购自大连宝生物工程有限公司。 　　HH-4型数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）、DGL-2004型电热鼓风干燥箱（烟台先科仪器有限公司）、5810R型高速冷冻离心机（Eppendorf公司）、微型电动粉碎机、AL104型电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）、LMQ-2360B型灭菌器（山东新华医疗器械股份有限公司）。 　　1.2 方法 　　干燥酸浆宿萼样品经清洗、烘干、粉碎后称取1 g，加入去离子水浸泡（37 ℃恒温），将溶液pH调至6.5，按一定比例加入纤维素酶、α-淀粉酶和木瓜蛋白酶，升温至50 ℃酶解12 h，100 ℃条件下灭活酶活性30 min，3 000 r/min离心5 min，取上清液，过滤，加入4倍体积95%乙醇醇沉30 min后，3 000 r/min离心5 min，保留滤渣，60 ℃烘干得到可溶性膳食纤维。 　　提取率=（提取的可溶性膳食纤维质量/原料质量）×100% 　　1.3 单因素试验 　　按以下比例分别在原料中添加不同种类的酶，研究其对酸浆宿萼可溶性膳食纤维提取率的影响。①脂肪酶添加量：0.6×102、1.2×103、1.8×103、2.4×103、3.0×103、3.6×103 U/g，纤维素酶添加量为4×104 U/g，α-淀粉酶为5×102 U/g，木瓜蛋白酶为1.2×103 U/g；②纤维素酶添加量：0、1×104、2×104、3×104、4×104、5×104、6×104 U/g，脂肪酶添加量参照优化后结果设定，α-淀粉酶添加量为5×102 U/g，木瓜蛋白酶为1.2×103 U/g；③α-淀粉酶添加量：0、1×102、2×102、3×102、4×102、5×102、6×102 U/g，脂肪酶和纤维素酶添加量参照优化后的结果设定，木瓜蛋白酶添加量为1.2×103 U/g；④木瓜蛋白酶添加量：0、1.2×103、2.4×103、3.6×103、4.8×103、6.0×103、7.2×103 U/g，其他酶添加量参照优化后的结果设定。 　　1.4 正交试验 　　在单因素试验的基础上，采用纤维素酶、α-淀粉酶、木瓜蛋白酶3个因素进