第三,23节.pptxVIP

第二节、λ噬菌体 λ基因组只有48.502kb,仅有T4基因组的30分之一。是双链线形DNA分子。 其DNA分子的特征是：在2个5’端各有一条12个碱基的单链序列，彼此完全互补，这种特殊的结构称为粘性末端（Cohesive end）。 λ双链线形DNA分子进入细菌细胞后，迅速通过粘性末端的互补作用形成环状的分子。 由粘性末端形成的双链区段称为cos位点。 一、λ噬菌体的生活周期 λ感染寄主后，其DNA整合进寄主染色体，整合形式的λ称为 原噬菌体。 整合原噬菌体的细菌称为 溶源细菌，这一过程称为溶源途径。 溶源细菌一般不被同种噬菌体感染，这种现象称为免疫性。 溶菌途径也称为噬菌体的营养生长。 诱导 溶源细菌特点 能自发释放和诱导释放噬菌体 对同一种噬菌体具有免疫性 溶源细菌表示：菌株后加括号，括号内 为噬菌体。如: E.coli K12 ( λ ) E.coli K12（P1） 二、λ噬菌体的溶源化及诱导释放机制 λ噬菌体的整合及溶源化 λ噬菌体的诱导和切离 第三节、反转录病毒（Retroviruses） 一、结构和生活周期 二、反转录病毒基因组 三、反转录过程中DNA双链的合成和LTR的产生 四、病毒线性DNA整合到寄主细胞基因组 五、原病毒的基因表达 1 病毒基因的转录 2 转录后加工 3 病毒mRNA的翻译 六、反转录病毒基因组及其复制特点 反转录病毒的重要性 是最早被发现与癌症有关的病毒，还引起白血病、淋巴瘤及其肉瘤。致癌机制已被广泛研究。 如：HIV引起人类的获得性免疫缺陷综合症（艾滋病）。RSV引起禽类的肉瘤。MLV引起小鼠白血病。 反转录病毒基因组可以通过DNA中间体整合进宿主基因组，可利用这种整合作用进行“基因治疗”。 反转录酶已经成为基因工程的重要工具。 重要的反转录病毒有： HIV：人类艾滋病病毒 RSV：禽类劳斯肉瘤病毒 MLV：小鼠白血病病毒 一、结构和生活周期： 结构 脂质包膜，外膜蛋白，跨膜蛋白，核衣壳， 2条正链RNA，核蛋白，反转录酶，整合酶，蛋白酶等等。 生活周期： 病毒感染寄主 核衣壳进入细胞质 核衣壳裂 解 释放RNA和反转录酶 合成dsNDA 整合 成为原病毒 转录mRNA和基因组 RNA 翻译病毒蛋白 包装病毒颗粒 以出芽方式分泌 获得包膜 病毒粒子 二、反转录病毒基因组 1 基因组为ssRNA，但病毒颗粒中有2条各自独立的ssRNA，5’端有典型的真核生物mRNA的帽子结构，3’ 端有多聚腺苷（poly A）。 2 所有的反转录病毒都含有的基因区域是：gag, pol, env, 致癌病毒含有scr, 参与细胞转化和癌变。 3 重复序列在反转录过程中起重要作用。 4 引物为 tRNA，各种病毒不同，都是从寄主细胞带入病毒粒子。 5 长末端重复序列（LTR）在反转录过程中形成，在整合和转录过程中起重要作用。 6 反转录酶主要是RNA聚合酶，但实际有3种酶活性： 反转录，由RNA合成DNA DNA聚合酶，由DNA合成DNA RNase H活性，降解RNA 三、反转录过程中DNA双链的合成和LTR的产生 反转录病毒RNA基因组U5的内侧有一个位点称为PBS,是tRNA引物结合位点。 RNA基因组就是以与tRNA互补配对的形式包裹在病毒颗粒内的。 病毒粒子进入细胞质以后， RNA基因组被释放出来，同时释放的还有反转录酶。 四、病毒线性DNA整合到寄主细胞基因组 反转录病毒的线形双链DNA分子合成以后，进入细胞核。 有的DNA分子呈线型，有的呈环状。近些年研究证明，反转录病毒是以线形DNA分子整合的。 体外实验证明，整合过程可以被单一的病毒整合酶所催化，转录病毒DNA的末端序列非常重要，如该序列有突变，则不能整合。 五、原病毒的基因表达 1 病毒基因的转录 只有整合进宿主基因组中的病毒DNA（原病毒）才可以持续的表达。 LTR不但提供了整合所需的末端序列，而且也提供了转录及转录后加工的信号。 图3－30 由原病毒DNA转录的RNA既可以作为mRNA进一步合成病毒的蛋白质，也可以作为子代病毒的RNA基因组。 2 转录后加工 反转录病毒RNA基因组以及大多数病毒mRNA并非一次合成的，而是经由1个初级转录本加工而成。 所有的反转录病毒RNA基因组和mRNA都具有相同的5’端。在5’端形成cap结构:m7Gp