第十三~1.pptVIP

相对误差小于4%时 透光率 65～15% 吸光度0.2～0.8 二、偏离吸收定律引起的误差 1. 单色光不纯的影响 2. 溶液的性质 3. 仪器误差 4、测量条件的选择 （1）入射光的波长 （2）吸光度范围 （3）参比溶液 §5 紫外—可见分光光度法应用实例 一、单组分含量测定 二、多组分含量测定 三、配合物组成的测定 四、定性分析 一、单组分含量测定 定量方法：根据朗伯—比耳定律关系式计算 标准曲线法 1、1,10-邻二氮菲法测定微量铁 显色剂 1,10-邻二氮菲是有机配位剂之一。 配位比 3:1 最大吸收波长=512nm ε 1.1×104L·mol-1·cm-1。 酸度范围 pH为3～9，醋酸缓冲溶液pH=4.5～5.0 还原剂 过量盐酸羟胺 测定铁含量 0.5～8μg·mL-1 2、磷钼蓝法测定全磷 样品处理 浓硫酸或高氯酸 H3PO4＋12(NH4)2MoO4＋21HNO3＝(NH4)3PO4·12MoO3＋12NH4NO3＋12H2O 以还原剂如抗坏血还原酸磷钼黄杂多酸为磷钼蓝 最大吸收波长 660nm 3、土壤中氮含量的测定 （1）铵态氮 奈氏试剂处理 ，在490nm处测定线性范围为0.5～16μg/mL （2）硝态氮 用酚二磺酸比色法在420nm下测定 ，线性范围0.05～9μg·mL-1 4、谷物蛋白质的测定 5、植物样品中可溶性糖的测定 6、酶活性测定 二 多组分的测定 1、吸收峰互不重叠 2、吸收峰相互重叠 三、配合物组成的测定 1、摩尔比法 2、连续变化法 光学分析法 的类型 光谱法 分子光谱、原子光谱 发射光谱、吸收光谱、荧光光谱、拉曼光谱等 非光谱法 §1 基本原理 一、分子能级(量)与电磁辐射 二、光的性质 三、物质的颜色与光的关系 四、物质吸收光的定律 一、分子能级(量)与电磁辐射 分子的能量包括：价电子能量（Ee） 1～20eV 分子内原子在平衡位置的振动能量（Ev） 0.025～1eV 分子绕重心转动的能量（Er） 小于0.025eV  E = Ee + Ev + Er 分子吸收光谱的特点：带状光谱 二 光的性质 单色光 ：只有一种波长的光 复合光 ：由两种及两种以上波长的光组成的 光 白光：红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等颜色的光按一定比例混合而成 互补色光 ：两种颜色的光按这一比例混合也可得到白光 白光 绿 紫 橙 青蓝 黄 青 蓝 红 物质的颜色 吸 收 光 颜色 波长/nm 黄绿 紫 400～450 黄 蓝 450～480 橙 绿蓝 480～490 红 蓝绿 490～500 紫红 绿 500～560 紫 黄绿 560～580 蓝 黄 580～600 绿蓝 橙 600～650 黄绿 红 650～700 三、物质的颜色与光的关系 物质的颜色由物质与光的相互作用方式决定 1. 全吸收 物质显示黑色，如金属粉末； 2. 全透射 物质显无色，如水、无色溶液、无色玻璃等； 3. 全反射 物质显示银白色，如银等金属； 4. 漫反射 物质显白色，如碳酸钠、氯化钠粉末； 5. 部分吸收部分透过 物质呈现吸收光的互补色。硫酸铜溶液吸收黄色光而呈蓝色；高锰酸钾溶液则吸收绿光而呈紫红色。 四、物质吸收光的定律——朗伯—比耳定律 1、吸收曲线 2、朗伯—比耳定律 设入射光强度为I0，透过光强度为I，溶液浓度为c，液层厚度为b，它们之间的定量关系表示为 当c的单位为g·L-1，b的单位为cm时，k称为吸收系数（absorption coefficient）以a表示。 若c的单位为mol·L-1，b的单位为cm，k称为摩尔吸光系数（molar absorption）以表示。