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实验技术二普通光学显微镜 油镜地使用
实验技术二 普通光学显微镜-油镜的使用 一、实验目的 熟悉普通光学显微镜的构造及各部 分的功能; 2. 学习并掌握油镜的原理和使用技术; 3. 观察常见微生物的形态。 二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理 (4)还原各部件。反光镜垂直于镜座,将物镜转 成“八”字 形,再向下旋。同时把聚光镜降下。 * * 显微镜的基本结构 机械部分 光学部分 底座 镜柱 镜臂 镜筒 载物台 物镜转换器 粗准焦螺旋 细准焦螺旋 目镜 物镜 反光镜 聚光器 油镜的工作原理 油镜的使用需在载玻片与镜头之间加滴香柏油,主要原因有: 1. 增加照明亮度.因其折射率与玻璃相同,光线通过载玻片直接通过油质进入物镜而不发生折射. 其中NA= n.sinα。α为光线最大入射角的半数,一般来说最大只能达到90°,而n为介质折射率。由于香柏油的折射率(1.51)比空气及水的折射率(分别为1.0和1.33)要高,因此以香柏油作为介质的油镜所能达到的数值孔径值要高于低倍镜、高倍镜。 λ 2NA 光波波长 物镜的数值孔径值 分辨率 = 2.增加显微镜的分辨率 三、实验器材 示玻片: 放线菌、细菌三型、青霉 菌、曲霉菌染色玻片标本。 2. 试剂: 香柏油、二甲苯。 3. 其他器材:显微镜、擦镜纸、吸水纸。 四、操作步骤 1.观察前的准备: 2. 显微镜观察: (1)低倍镜观察: (2)高倍镜观察: (3)油镜观察: (1)取镜安放 (2)光源调节 滴香柏油 调焦 低倍镜的观察 高倍镜的观察 侧面注视,升载物台使油镜与香柏油接触 油镜的观察 转油镜 调焦 选定视野 放置切片 调节光源和焦距 (1)降下载物台,取下载玻片。 3. 显微镜用毕后的处理 (2)擦香柏油 (3)用擦镜纸清洁其他物镜及目镜;用绸布 清洁显微镜的金属部件。 先用擦镜纸拭去镜头上的香柏油,再蘸少许二甲苯擦去残留油迹,最后用干净擦镜纸擦去残留二甲苯。 *
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