花粉贮藏和生活力检测.pptVIP

果树花粉的贮藏和生活力的测定 三、方法和步骤 （一）花粉的贮藏 从发育良好的植株上采下将开的花朵、取出花药放在纸上或培养皿中，放于25°的恒温培养箱，令其开裂，花药裂开后将花粉倒入小玻璃瓶或指形管中，口上塞以棉花或橡皮塞，贴上写有品种名称的标签。再把花粉瓶放于干燥器内，使花粉在空气相对湿度较低的条件下（一般0～40%）保存；为了减少呼吸作用，可以放在低温（0～4℃、-20℃ 、-70℃ ）黑暗的地方贮藏。 （二）花粉生活力试验 　　1、花粉萌发法 正常的成熟花粉粒具有较强的活力，人为的创造适合于花粉萌发的环境条件，以花粉萌发的情况来鉴定花粉生活力的强弱，此法的缺点是花粉萌发条件与实际不完全相符，所得的结果与实际有一定的差异，但操作方便，能测定出相对发芽率来。 （1）培养基的制作与接种 　　用胶头滴管滴一滴培养基敷在载玻片上，然后用接种针沾以少量花粉。轻轻振动，使花粉均匀地撒在培养基上，将载玻片放在垫有湿润滤纸培养皿内，外覆保鲜膜。并贴上标签写明处理、种类、播种日期，将培养皿放于25℃的恒温箱中培养。 　　（2）观察记数 　　在显微镜下隔一定时间检查一次（花粉发芽快的经过几个小时即可观察到已经萌发，慢的需24小时以上）若发现花粉已萌发时，便按一定方向，就同一视野中记录花粉粒总数和发芽数，观察记录3～5个显微镜视野的数字，求其平均数，即得出花粉发芽百分率。花粉发芽的标准，以花粉管伸长超出花粉直径为准。 2．染色法 　　（过氧化物酶测定法） 　　原理：具有生活力的花粉含有活跃的过氧化物酶。此酶能利用过氧化物使各种多酚及芳香族胺发生氧化而产生颜色，依据颜色可知花粉有无活力。 使用时，先在载玻片上加少量待测花粉，然后在花粉上滴试剂Ⅰ和试剂Ⅱ各一滴，仔细搅匀，盖上盖玻片，经3～4分钟后，再放在显微镜下检查，有生活力的花粉呈红色或玫瑰色，无生活力的花粉为黄色或无色，为了确定具有生活力的花粉百分率，要连续观察3～5个视野，求其平均值，将观察结果填入表内。 作业 1、绘出花粉发芽前后形态图。 2、统计几种测定方法的花粉发芽率。 3、将花粉发芽法与染色法测定的结果作一比较，分析其差异原因。哪种方法较优越。 * * ? 一、实验目的? 1.了解花粉的主要贮藏方法。 2.学习并掌握花粉生活力与发芽率的测定方法。 二、材料与用具 1.材料：梨树花粉 2. 仪器： 显微镜、盖玻片、载玻片、解剖针、培养皿(托盘)、干燥器、指形管、滴瓶、天平、胶头滴管、培养箱等 试剂： 蒸馏水、蔗糖、琼脂、硼酸、联苯胺、α-奈酚、碳酸钠、过氧化氢、酒精等。 试剂Ⅰ：0.2%联苯胺溶液 0.15%α-萘酚溶液 0.25%碳酸钠溶液 试剂Ⅱ：0.03%H2O2溶液 使用前混合 四、思考题 1.上述方法是否适合于所有植物花粉活力的测定？ 2.哪一种方法更能准确反映花粉的活力？