产沼气微生物低温发酵的研究分析.docVIP

产沼气微生物低温发酵技术研究 一、立项依据 项目的目的及意义 1.1沼气推广及应用中的问题 沼气是我国农村目前最有发展前景的可再生能源，对减少农村废弃资源，由于应用较早、范围广、发酵工艺和发酵技术相对成熟以及容易掌握，沼气的开发利用为减少环境污染、降低碳排放，减轻农民燃料负担，保护和改善生态环境起到巨大的作用。在全国各地农村，沼气池的建造正以燎原之势在广大农村发展起来，据统计截至2006年底中国已建成的户用沼气总数已超过2200多万个[1]，2009年底突破3000万个[2]。2008年至2009年底，两批新增沼气项目已累计建成户用沼气280多万户、各类沼气工程8750座加快推进农村户用沼气、大中型沼气和集中供气工程建设，加强沼气技术创新、维护管理和配套服务。支持农村开发利用新能源，推进农林废弃物资源化、清洁化利用。Clostridia）或兼性厌氧的链球菌（Streptococci）等各种各样的土壤细菌[9]来完成，Attar等[17]对沼气池添加经筛选的纤维素水解放线菌，使沼气产量提高8.4-44%。Geeta等[18]发现甘蔗渣中添加白腐菌（Phanerochaete chrysosporium）在混合牲畜排泄物能明显增加产生的沼气量；马诗淳[5]经过筛选一株分解纤维素细菌并将其添加到其实验室的厌氧降解纤维素产甲烷复合菌系CBC中，在中温条件下具有较高纤维素降解率，甲烷产量提高10%以上。邓宇等[23]登记了一种厌氧降解纤维素产甲烷的复合菌 除了水解菌群的低温驯化外，产甲烷菌在低温下的多样性和不稳定性，各菌群之间的协作还需要进一步研究。Sekiguchi等[44]的研究发现低温条件下产甲烷菌的种类较多,并且以只能利用乙酸产CH4的甲烷毛菌(Methanosaetaceae)为主，而利用H2产甲烷的甲烷杆菌属（Methanobacterium），甲烷球菌属（Methanococcus）以及甲烷微菌属（Methanomicrobium）等受到抑制；Nozhevnikova[15，16]研究表明，在牛粪中添加了经1年半驯化的低温产甲烷菌群，在15℃下甲烷产量增加30%，6℃下更增加超过10倍，但随着温度上升至中温后两者基本没有差别，其认为经过长时间低温筛选出嗜冷菌群或者令普通的中温菌群产生低温适应性，同时，他也指出这个菌群对温度上升非常敏感，容易失去低温下保持的平衡，并且让嗜中温或高温菌群迅速占据生长优势，低温适应性也随之减弱，因此从中温转入低温发酵时，有必要额外添加冷适应菌群加快菌群调整。 目前研究添加经低温驯化的单水解菌株或菌群能增加低温下沼气的产量，但仍存在一些问题。但是就单菌种而言，可以有针对性的筛选具低温厌氧蛋白质、纤维素分解能力的菌株，但部分菌株不容易得到纯培养（或不可培养），许多研究只重视菌株的分离以及实验室条件下的沼气产量，而没有注意配合实际发酵原料，菌株加到沼气池后，发酵过程中该菌株的活性以及所起到得作用没有得到进一步的研究；就低温驯化菌群而言，可以解决部分不可培养细菌（特别是产甲烷菌）的问题，但驯化周期较长、微生物互生关系复杂，对不同底物的以及温度变化适应性有限，不利于改进和优化发酵条件；另外，添加额外的水解菌种可能破坏原来低温驯化菌群内在的平衡性，添加细菌种类以及添加条件有待进一步明确。 项目产业化前景分析 生物质能是重要的可再生能源，且洁净环保，可以减少化石能源消耗带来的温室效应加快推进农村户用沼气、大中型沼气和集中供气工程建设，加强沼气技术创新、维护管理和配套服务。支持农村开发利用新能源，推进农林废弃物资源化、清洁化利用。加强沼气技术创新、维护管理和配套服务变性梯度凝胶电泳系统 反馈 研究分析蛋白质以及纤维素水解菌群在沼气低温发酵中的作用 实际应用 刺激因子筛选以及复配 低温沼气池试验 底物物理化学变化分析 低温厌氧产甲烷复合菌群 纯种菌株选定 生理生化分析 菌株初步鉴定 低温产甲烷菌群 低温蛋白质水解 低温蛋白质水解 低温厌氧筛选 单菌或多菌与低温菌群复配 低温厌氧驯化 DGGE菌落结构分析 单菌株数量及影响因素分析 分离纯化单菌株 低温沼气池样品