20172018学年高中生物浙科版（浙江专版）选修3教学案：第二章+第二节+动物的克隆+Word版含答案.docVIP

第二节动物的克隆 一、动物细胞的培养和克隆形成 1．动物细胞的培养 (1)过程(填图)： (2)培养瓶内细胞生长特点： ①贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁生长。 ②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。 (3)原代培养与传代培养： ①原代培养：从机体取出后立即进行的细胞或组织培养为原代细胞。 ②传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养(10代以外的培养)。 2．细胞系和细胞株 (1)细胞系：可连续传代的细胞。原代培养物在首次传代时就成为细胞系，能连续培养下去的细胞系称为连续细胞系，不能连续培养下去的细胞系称为有限细胞系。二倍体细胞通常为有限细胞系。连续细胞系被认为是发生转化了的细胞系，大多数具有异倍体核型。有的连续细胞系是恶性细胞系，具有异体致瘤性；有的连续细胞系获得了不死性，但保留接触抑制现象，不致癌。 (2)细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。细胞株一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等。可以连续多次传代的细胞株称为连续细胞株，传代次数有限的细胞株称为有限细胞株。 3．克隆培养法 (1)概念：把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，也称为细胞克隆。 (2)特点：由于来源于一个共同的祖细胞，所以称为纯系，也就是克隆。 (3)提高细胞克隆形成率的措施：选择适宜的培养基、添加血清(胎牛血清最好)、以滋养细胞支持生长、激素(胰岛素等)刺激、使用CO2培养箱、调节pH等。 二、动物的细胞融合技术及其应用 1．细胞融合 (1)概念：是指在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。 (2)原理：细胞膜的流动性。 (3)诱导融合的方法： ①物理方法和化学方法：电激法、聚乙二醇等。 ②生物方法：灭活的病毒(如仙台病毒)。 2．细胞杂交 (1)概念：基因型不同的细胞间的融合称为细胞杂交。 (2)过程： (3)应用：由于细胞杂交中染色体容易丢失，利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物(蛋白质)减少的对应关系可以进行基因定位。 3．杂交瘤技术和单克隆抗体的制备 (1)制备过程： ①用外界抗原刺激动物，使其发生免疫反应，使B淋巴细胞产生抗体。 ②利用仙台病毒或聚乙二醇等作介导，使经免疫的动物的脾细胞与可以无限传代的骨髓瘤细胞融合。 ③经过筛选、克隆培养，获得来自单一细胞的既能产生特异抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞克隆。 (2)杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大优点：可以从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中提取单抗。 (3)单抗的运用：可作为特异探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。 三、动物的克隆繁殖 1．动物细胞全能性 (1)动物细胞的分化被认为不可逆的，在动物发育过程中，细胞的发育潜能逐渐变窄。 (2)全能性大小： ①受精卵＞多能胚胎细胞＞单能干细胞＞高度分化的体细胞。 ②低等动物细胞＞高等动物细胞。 2．动物体细胞克隆 3．动物难以克隆的根本原因 在动物的个体发育过程中，细胞分化使得细胞发生了基因的差异表达，细胞基因组中基因的活动很不完全。 1．动物细胞培养过程的顺序是(　　) ①原代培养　②传代培养　③胰蛋白酶处理组织，形成单个细胞，制成细胞悬液 A．①②③　　　　　　　　　B．①③② C．②①③ D．③①② 解析：选D　动物细胞培养是用动物胚胎或幼龄动物器官通过胰蛋白酶处理制成细胞悬液，再通过原代培养和传代培养得到细胞株。 2．进行动物细胞培养时，最好选用的培养材料是(　　) A．衰老的动物组织细胞 B．成熟动物个体的体细胞 C．动物的受精卵 D．动物胚胎或幼龄个体的器官或组织 解析：选D　动物细胞培养一般选择动物胚胎或出生不久的幼龄个体的器官或组织作为培养材料，因为这些器官或组织的细胞生命力旺盛，分裂能力强。 3．下列哪项条件不是动物细胞培养所需要的(　　) A．无菌、无毒的环境 B．充足的营养物质 C．适宜的温度和pH D．氧气培养箱 解析：选D　动物细胞培养需要二氧化碳培养箱，不需要氧气培养箱。 4．进行哺乳动物克隆时，细胞核供体细胞不能是(　　) A．乳腺细胞 B．卵细胞 C．胃腺细胞 D．胚胎细胞 解析：选B　卵细胞是由减数分裂形成的，其染色体数目是体细胞的一半，不能用作哺乳动物克隆时的细胞核供体细胞。 5．在克隆多莉羊的过程中，下列哪项技术没有运用到(　　) A．细胞培养技术 B．细胞核移植技术 C．胚胎移植技术 D．基因工程技术 解析：选D　多莉羊的培育过程中首先运用了细胞核移植技术获得重组细胞，然后通过细胞的体外培养形成早期胚胎，最后把这个胚胎移植到代孕母羊子宫中完成后续的胚胎生长发育。在整个过程