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医学免疫学 免疫学检测技术课件
腹腔热灌注化疗在腹膜假性黏液腺瘤治疗中应用肝功能异常时肠外营养中氨基酸的应用钢球磨煤机顶轴润滑油站系统讲解剖析高密隆运服务顾问和客服思想意识和基础汽车知识话术讲解流程培训高新技术企业与研发费加计扣除政策讲解苏州工业园区地方税务局 免疫学检测技术 Immunodiagnosis 第一节 抗原或抗体检测 I. Detection of antigens or antibodies 一、抗原-抗体反应的特点 Specificity (一)高度特异性 Cross-reaction: common antigen 交叉反应:共同抗原 Antiserum absorption 抗血清吸收 1st antibody 2nd antibody 一抗;二抗 Reversibility/invertibility: (二)可逆性 non-covalent, surface-binding , dissociable 非共价、表面结合,可解离 complementary capacity: affinity; avidity 互补程度:亲和力 ; 亲合力 Visibility (三)可见性的条件 Compatible concentrations of antigen and antibody combined in proportion at or near equivalence [Antigen: multivalent; Antibody(IgG): divalent ] 比例适合:抗原多价,抗体2价。交织成网。 Ph value; Temperature; Ionic concentration 条件适宜:酸碱度、温度、离子浓度 Adequate concentration, binding strength; reaction time 足够浓度、结合强度和反应时间 Prozone phenomenon前带现象 I ) Agglutination (一)凝集反应: 颗粒性抗原或包被有可溶性抗原的颗粒 + 相应抗体?肉眼可见的凝集块 1. 直接凝集 颗粒性抗原+ 相应抗体 玻片凝集:抗原定性 (ABO血型) 试管凝集:抗体定量 (肥达反应) 2. 间接凝集 包被有可溶性抗原的颗粒 + 相应抗体 红细胞(间接血凝);乳胶(间接乳凝) Coombs’ Test: 红细胞(Rh抗原)+ 不完全抗体 + 抗人球蛋白 3. 派生的试验 反向间接凝集反应:包被抗体的颗粒 + 抗原 间接凝集抑制反应: (乳胶妊娠试验) 抗体 + 未知抗原 + 包被有相应可溶性抗原的颗粒? 凝集? Haemagglutination II ) Precipitation (二)沉淀反应 可溶性抗原 + 相应抗体?肉眼可见的沉淀物 使用半固体琼脂凝胶为介质——琼脂扩散/免疫扩散 1. 单向免疫扩散:抗原 的定量(Ig、C3 ) 2. 双向免疫扩散:抗原/抗体的定性、组成及Ag相关性分析 3. 免疫电泳: 电泳 + 双向免疫扩散 (抗原分析) 4. 对流电泳: 双向免疫扩散 + 电泳 (抗原/抗体定性) 5. 火箭电泳: 单向免疫扩散 + 电泳 (抗原定量) 免疫比浊: 抗体 + 递增量抗原?比浊(抗原定量) III ) Immunolabelling Techniques (三)免疫标记技术 标记物: 荧光素、酶、放射性核素、电子致密物质、化学发光物质 标记对象:抗原或抗体 用途: 定性、定量、定位 免疫荧光法(IFA ) 荧光素可双色;使免疫复合物呈荧光;可定性、定位 (1)直接荧光法 (2)间接荧光法: 荧光素一抗 荧光素二抗
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