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液相色谱方法开发液相色谱方法开发 液相色谱方法开发液相色谱方法开发 液相色谱方法开发液相色谱方法开发 液相色谱方法开发液相色谱方法开发 ©2008 Waters Corporation 开发液相色谱方法开发液相色谱方法 开发液相色谱方法开发液相色谱方法 开发液相色谱方法开发液相色谱方法 开发液相色谱方法开发液相色谱方法 液相色谱方法即液相色谱实验所需的基本参数,包括以下各项内容: — 流动相:种类及配比(等度或梯度) — 固定相:色谱柱类型及内径,长短 — 流动相输送系统参数:流速 — 检测器参数:检测波长,灵敏度等 — 温度控制 — 进样量 以上参数即构成一个具体的HPLC方法,亦称色谱条件色谱条件 色谱条件色谱条件 ©2008 Waters Corporation 2 评价液相色谱方法的标准评价液相色谱方法的标准 评价液相色谱方法的标准评价液相色谱方法的标准 评价液相色谱方法的标准评价液相色谱方法的标准 评价液相色谱方法的标准评价液相色谱方法的标准 问题 ∶什么样的分离结果是好的?分离度? ©2008 Waters Corporation 3 什么是液相色谱的分离度什么是液相色谱的分离度？？ 什么是液相色谱的分离度什么是液相色谱的分离度？？ 什么是液相色谱的分离度什么是液相色谱的分离度？？ 什么是液相色谱的分离度什么是液相色谱的分离度？？ 分离度的定义分离度的定义：： 分离度的定义分离度的定义：： v2 −v1 R = 1 (w +w ) 2 1 2 R: 分离程度的量度分离程度的量度 分离程度的量度分离程度的量度 ©2008 Waters Corporation 4 影响分离度的因素影响分离度的因素k′′, αα,N 影响分离度的因素影响分离度的因素 ′′ αα 影响分离度的因素影响分离度的因素k′′, αα,N 影响分离度的因素影响分离度的因素 ′′ αα 分离度方程 ∶ k αα − 1  N     αα