2017年高考生物一轮复习专题11.2植物组织培养技术及DNA和蛋白质技术教学案(含解析).docVIP

11.2 植物组织培养技术及DNA和蛋白质技术 1.植物的组织培养 2．血红蛋白的提取与分离。 3.从生物组织中提取某些特定成分。 4.实验：DNA的粗提取与鉴定。 一、菊花组织培养 1．植物组织培养的过程和原理 (1)原理：植物细胞的全能性。 (2)高度分化的细胞全能性表达的条件 ①离体状态。 ②营养物质：有机营养、无机营养。 ③植物激素：生长素、细胞分裂素等。 ④无菌、适宜的外界条件。 (3)过程 2.菊花组织培养过程 (1)影响植物组织培养的主要因素 ①选材：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 ②营养供应 (2)实验操作过程 制备MS固体培养基：配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌 　 外植体消毒：→→→ 　 接种：始终在酒精灯火焰旁进行，对接种工具要用火焰灼烧 灭菌。将菊花茎段插入培养基中时注意不要倒插 　 培养与移栽：在18～22 ℃的无菌箱中培养，得到试管苗后 进行移栽 3．影响植物组织培养的主要因素 (1)培养材料 ①不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。 ②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短对培养也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。 (2)无菌条件 培养基上有细菌等微生物存在时，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡，因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。 二、月季的花药培养 1．被子植物的花粉发育过程 ?四分体时期?单核期?双核期?花粉粒 2．产生花粉植株的两条途径 3．影响花药培养的因素 (1)主要因素：材料的选择和培养基的组成。 (2)月季花药培养一般选择单核期。 三、DNA的粗提取与鉴定 1．基本原理 2．操作过程 材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织 破碎细胞(以鸡血为例)：鸡血细胞，加蒸馏水，用玻璃棒搅 拌，用纱布过滤，收集滤液 去除杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质 DNA析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液 DNA的鉴定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂， 沸水中加热5 min，溶液变成蓝色 易错警示！　(1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。 (2)实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。 (3)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影响鉴定效果。 四、PCR技术的基本操作和应用 1．PCR原理 DNA热变性原理，即： 2．PCR反应过程 (1)变性：当温度上升到90_℃以上时，双链DNA解旋为单链。 (2)复性：温度下降到55_℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 (3)延伸：温度上升到72 ℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 五、血红蛋白的提取和分离 1．方法及原理 方法 原理 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 电泳法 各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同 2.血红蛋白的提取和分离过程 六、植物有效成分的提取 1．植物芳香油的提取 (1)提取玫瑰精油实验 ①方法：水蒸气蒸馏法。 ②实验流程 (2)提取橘皮精油的实验 ①方法：一般用压榨法。 ②实验流程 石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤 　　　　　　　　　　 橘皮油←再次过滤←静置 2．胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素的性质：不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。 (2)实验设计 ①方法：萃取法，石油醚最适宜作萃取剂。 ②实验流程 胡萝卜→粉碎→干燥→萃取 　　　　　　　　 胡萝卜素←浓缩←过滤 (3)鉴定方法：纸层析法。 高频考点一　菊花的组织培养 例1.下列有关植物组织培养技术的叙述，正确的是(　　) A.经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性 B.在愈伤组织培养过程中加入聚乙二醇，可获得染色体加倍的细胞 C.利用纤维素酶和果胶酶去除外植体的细胞壁有利于脱分化的发生 D.培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向 【答案】D 【变式探究】为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基(见下表)，灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率(m)，以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)，结果如下表。 培养基编号 浓度/mg·L－1 m/%