流式细胞仪分析技术和应用ppt课件.pptVIP

第十七章 流式细胞仪分析技术及应用; 流式细胞术(flow cytometry, FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。 ;;;采用激光作为激发光源， 利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术 用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数信号进行数据处理分析，; （1） 液流系统 （2） 光学系统 （3） 数据处理系统;由样本和鞘液组成 待测细胞 单个细胞的悬液 荧光染料标记的单抗对其染色 受清洁气体压力 从样品管进入流动室形成样本流 ;;喷嘴;FCM的液流系统（如何形成单个细胞流）;激光光源：气冷式氩离子激光器 分色反光镜：反射长/短波长，通过短/长波长 光束成形器：两十字交叉放置的透镜 透镜组：形成平行光，除去室内光 滤片：长通、短通、带通 光电倍增管：FS, SS（散射光）， FL1, FL2, FL3, FL4（荧光）;;主要由计算机及其软件组成;基本工作原理;单细胞液柱;; 细胞在液柱中与激光束相交时向周围360°立体角方向散射的光线信号，它的强弱与细胞的大小、形状、胞内颗粒折射等有关，主要分为前向散射光和侧向散射光。;; 前向散射光（forward scatter, FS）：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度(0.