蛋白质组分析中mutans链球菌酸碱代谢表格型.docVIP

蛋白质组分析中mutans链球菌酸碱代谢表型 　　爱丽丝,德里克·林之Harty和尼古拉斯·a .雅克 　　牙科研究所,Westmead千年研究所和Westmead口腔保健中心、宝箱、新南威尔士、533、Wentworthville 2145澳大利亚 　　文摘 二维凝胶电泳分析蛋白质的mutans链球菌生长在一个稳定的状态glucose-limited厌氧连续大量的蛋白质,揭示了不同的表达当增长了降低pH值7?从0到pH值五?0。在表达的变化通常是限于蛋白质代谢生化途径:糖酵解作用,三酸的生产,选择branched-chain氨基酸的合成。相关的蛋白表达点代表所有的酶,所有的Embden-Meyerhof-Parnas通路但是酶的主要路径选择的s . mutans酸发酵,被确认和计量。蛋白质组数据,结合产品和cell-yield分析,是符合表型变化,允许mutans .在低pH值,通过扩大增殖能量挤压多余的细胞,H +从最小的不利影响,造成的碳通量的去偶从代谢和随之而来的失衡和丙酮酸生产NADH。酶含量的变化与减少形成强烈的酸、甲酸,那是一种后果,两者的丙酮酸乳酸、branched-chain氨基酸的生产时的mutans .培养了酸性环境。 缩写:2-DGE、二维凝胶电泳技术;ASB-14,amidosulfobetaine-14;D、稀释剂、微分表达式;德(价值)、肺、固定化pH值梯度;IPS,细胞内的多糖,MALDI-TOF,matrix-assisted激光解析电离飞行时间;PEP-PTS、磷酸葡萄糖phosphotransferase系统;PMM:大众映射,YATP、肽,ATP产量、干重、YGlc细胞组分ATP产量、干重、细胞的细胞组分葡萄糖 　　龋齿的临床与acidogenic细菌和aciduric分泌和容忍有机碳水化合物代谢副产品酸性发酵。通过他们的demineralizing珐琅质,这些行为都开始有机酸,该疾病的病因学的。在过去的50年间,研究着眼于龋齿的口腔链球菌,特别是链球菌mutans,这是现在的接收与启蒙的各种形式的疾病(Hamada 斯莱德,1980年,哈珀和莱莱,1986年,1984;1994年成立;Houte;范·Ruyven,等,2000年)。 大量的研究一直致力于研究,特别是链球菌糖类新陈代谢的生理生化、mutans产酸允许s和生存在低pH值在口腔。从历史上看,这个研究已经雇了一个简化方法研究生物化学过程的监管等构酶和改造的通量的代谢物(Iwami 山,1980年,汉密尔顿,1984年,山田,1987;Carlsson和汉密尔顿,1996;Quivey等,2001年)。一些最近的报告,然而,利用更整体战略体系由蛋白质组分析aciduricity机制mutans位点。例如,一个二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DGE分析的14C-labelled细胞内蛋白质显示64蛋白质上调,49,下调,当细胞从pH 7?震惊,pH值五?五0。身份,这些蛋白质有待确定(Svensater等,2000年)。在相关的研究中,18种蛋白上调和12下调当相对2-DGE蛋白质组之间的mutans .生长在一批文化、无酸度控制,从开始的酸碱值0 - 5??七2。27个蛋白,由大众光谱分析13被卷入糖运输和中央新陈代谢(威尔金斯等,2002年)。在后者的报告,mutans是采集和分析,在此阶段mid-exponential阶段的酸碱值的两种不同的文化已经下降到6??二、四7。取得了显著不同繁殖世代数,1??h和六0 - 6小时,在这两个小灵通威尔金斯(。这种变化的pH值进行批量文化的理解中观察到的改变蛋白质很难评价的关系,仅从批文化从细胞已经连续回应一个不断变化的外部环境。相比之下,continuous-culture方法应用于该研究中所具有的优势 　　在目前的研究中,蛋白质的s . mutans,生长在稳态在pH 7?0人工唾液中,定义了已经相比,细胞生长在pH值五?0。该方法已被选来模拟条件的牙菌斑和健康的个体相比,更容易的主人。同时,从某种程度上来说,本文分析了表型的适应程度,在酸性容忍它显示变动而变动的表达的蛋白质代谢途径的限制;特别是,关键生产、糖酵解过程、酸branched-chain合成的氨基酸。相反,在前人研究Svensater(2000):《或少于18 %(威尔金斯等,2002年)的蛋白质在这些途径进行检测,该研究还发现了83的酶在这三个生化途径。这个数据是一致的mutans .假设的酸性环境相适应,通过最小化,使用H +生产的一系列不同的策略。是这样,尽管消耗ATP所需的H +挤出和合成去偶碳利用合成代谢过程。 　　生长和菌株的条件。 　　mutans LT11连续文化葡萄球菌(道等,1993)生长在厌氧条件下在