小鼠肝泡型包虫病中mirnas表达谱的初步筛选及mir-106b-25基因簇的表达和意义-preliminary screening of mirnas expression profile in mouse hepatic alveolar echinococcosis and expression and significance of mir - 106b - 25 gene cluster.docxVIP

万方数据 万方数据 中英文缩略词对照表 英文缩写 英文全名 中文译名 AE Alveolar Echinococcosis 泡型包虫病 CE Cystic Echinococcosis 囊型包虫病 ddH2O distilled water 双蒸馏水 DEPC Diethylpyocarbonate 二乙基焦碳酸酯水 Em Echinococcus multilocularis 多房棘球绦虫 Eg Echinococcus granulosus 细粒棘球绦虫 HE hematoxylin and eosin 苏木素-伊红 miRNA microRNA 微小 RNA nt Nucleotide 核苷酸 OD Optical density 光密度 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 P propability 概率 RT-PCR reverse transcription-polymerase chain Reaction 逆转录多聚酶链反应 RT-qPCR Real-time Quantitative PCR 实时定量 PCR SAM Significance Analysis of Microarrays 基因芯片显著性分析 SSC Sodium Chloride-Sodium Citrate 柠檬酸缓冲液 UTR Untranslated Region 非翻译区 wk End of week 周 目 录 摘要………………………………………………………………………………… 1 ABSTRACT……………………………………………………………………… 2 前言………………………………………………………………………………… 4 材料与方法………………………………………………………………………… 7 1 材料………………………………………………………………………… 7 1.1 动物模型建立……………………………………………………… 7 1.2 标本采集…………………………………………………………… 7 1.3 主要试剂…………………………………………………………… 7 1.4 主要仪器…………………………………………………………… 9 1.5 引物设计和合成…………………………………………………… 10 2 方法………………………………………………………………………… 11 2.1 病理学检查（HE 染色）…………………………………………… 11 2.2 miRNAs 芯片杂交扫描…………………………………………… 13 2.3 RT-qPCR 验证芯片分析结果……………………………………… 16 2.4 靶基因预测………………………………………………………… 17 2.5 统计分析方法……………………………………………………… 17 2.6 技术路线图………………………………………………………… 18 结果………………………………………………………………………………… 19 讨论………………………………………………………………………………… 34 小结………………………………………………………………………………… 41 致谢………………………………………………………………………………… 42 参考文献…………………………………………………………………………… 43 综述………………………………………………………………………………… 47 攻读硕士学位期间发表的学位论文……………………………………………… 56 导师评阅表………………………………………………………………………… 57 新疆医科大学硕士学 新疆医科大学硕士学位论文 小鼠肝泡型包虫病中 miRNAs 表达谱的初步筛选及 miR-106b-25 基因簇的表达和意义 研究生：叶建蔚 导师：王云海 教授/主任医师 摘 要 目的：初步筛选泡球蚴感染宿主肝脏中 miRNAs 的表达谱并探讨 miR-106b-25 基因簇在肝泡型包虫病中的表达及意义。方法：取雌性 Balb/c 小鼠随机分为实验组、 对照组和正常组，实验组小鼠腹腔注射泡球蚴，对照组腹腔注射等容量生理盐水， 正常组不作处理并在接种当日采集肝脏标本。接种后 1 月、3 月和 6 月分别各取 5 只造模成功的实验组和对照组小鼠肝脏标本，提取 RNA；将感染 3 月小鼠肝脏的小 分子 RNA 标记后与 miRNAs 微阵列芯片杂交。扫描杂交后的芯片并进行数据分析， 得到肝泡型包虫病的 miRNAs 表达谱。荧光定量 RT-PCR 法检测在 1 月、3 月、6 月三个时间点泡球蚴病小鼠肝脏中 miR-93、miR-106b、miR-494、miR-152、miR-191 和 miR