ICAM-1MCP-1在糖尿病肾病SD大鼠肾脏中的表达孙侠武昕.DOCVIP

[作者简介]孙侠 (1979- )，女，助理研究员，现从事实验动物病理学研究工作。 [通讯作者]邝少松 (1973- )，女，高级兽医师，主要从事实验动物疾病模型研究，Email: HYPERLINK mailto:river-t@126.com kuangss@126.com。 ICAM-1、MCP-1在糖尿病肾病SD大鼠肾脏中的表达 孙侠，武昕，林小婷，饶子亮，钟志勇，邝少松 （广东省医学实验动物中心 广东 佛山 528248) 【摘要】：目的 制作糖尿病肾病SD大鼠模型，观察糖尿病肾病大鼠肾脏的病理学改变，测定ICAM-1、MCP-1在糖尿病肾病大鼠肾脏中的表达。方法 SD大鼠随机分成正常对照组、模型组两组，模型组SD大鼠隔夜空腹12h，按65 mg/kg一次性腹腔注射1%的链脲佐菌素（STZ）溶液，12周后行安乐死处死动物取双侧肾脏，4%多聚甲醛固定，常规制片，HE染色，PAS染色，显微镜下观察肾脏组织的病理学改变，同时免疫组化法测定肾脏组织中ICAM-1、MCP-1的表达。结果 正常对照组SD大鼠肾脏未见明显病理异常；模型组SD大鼠肾脏镜下见部分肾小球体积增大、肾小球毛细血管基质增生，部分肾小管上皮细胞轻度透明变性，其中1只大鼠肾脏见慢性肾盂肾炎。模型组SD大鼠肾小球平均横截面积（MGA）较正常对照组显著增大，模型组SD大鼠肾小管上皮细胞透明变性、肾小球基质增生较正常对照组显著增多。模型组SD大鼠髓质部分肾小管内ICAM-1表达阳性，阳性着色平均光密度值较正常对照组显著增加；模型组SD大鼠肾皮质部分肾小管MCP-1阳性表达，阳性着色平均光密度值与正常对照组比较未见统计学差异。结论 模型组SD大鼠肾脏ICAM-1表达升高，提示ICAM-1在糖尿病肾病早期发挥重要作用。 【关键词】ICAM-1；SD大鼠；糖尿病肾病；免疫组织化学；链脲佐菌素 近30年来， 随着人民生活水平的不断提高，我国糖尿病患病率不断增加，对糖尿病的防治是医学研究者的一个重要课题。糖尿病肾病( diabetic nephropathy，DN) 是糖尿病的主要并发症之一，约30%的糖尿病患者会发展为DN。糖尿病肾病是以系膜细胞增生和细胞外基质增多、肾小球基底膜增厚与肾小球硬化为基本病理特征的病变，发生机制复杂， 目前未完全阐明[1]。糖尿病模型的建立方法很多，国内多用传统的药物法诱导急性糖尿病模型，诱导的化学药物主要为链脲佐菌素(Streptozocin,STZ) 和四氧嘧啶(Alloxan,ALX)[2-3]。本研究采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法制作大鼠糖尿病模型，对STZ糖尿病大鼠肾脏组织病理学变化进行了观察，并采用免疫组织化学的方法对ICAM-1、MCP-1在糖尿病大鼠肾脏中的表达情况进行了测定。 1　材料与方法 1.1 材料 1.1.1实验动物 SPF级SD大鼠，25只，雄性，10周龄，由广东省医学实验动物中心提供，实验动物质量合格证号：0116197。 1.1.2 实验环境 动物饲养在广东省医学实验动物中心SPF级动物房，实验动物使用许可证号：SYXK（粤）2008-0002。动物饲养条件：5只/箱，群养，饲养温度与湿度：20～26℃，40～70％，采用10h:14h昼夜间断照明；饲养室条件始终保持稳定，以保证试验结果的可靠性。喂以全价颗粒饲料（由广东省医学实验动物中心提供）。自由进食饮水，饮用水为广东省医学实验动物中心提供的纯净水，由饮水瓶自由摄取。 1.1.3 主要试剂 链脲佐菌素( STZ) 购自sigma公司，批号：110610，用0.1mol/L柠檬酸缓冲液配成1%溶液，现配现用；柠檬酸购自广州市中南化学试剂有限公司，批号101205；柠檬酸钠购自广州市中南化学试剂有限公司，批号091203； ICAM-1一抗，货号bs-0608R，购自北京博奥森生物技术有限公司，批号201301；MCP1一抗，货号bs-1101R，购自北京博奥森生物技术有限公司，批号201301；增强型二步法检测试剂盒，型号PV-6001兔 kit，购自北京中杉金桥生物技术有限公司，批号201301。 1.1.4主要仪器 BS-3000A型电子天平：上海友声衡器有限公司，感量0.1g；one touch ultra型血糖仪：强生（中国）医疗器材有限公司；血糖试纸：强生穏豪，代码25，美国强生公司；TS-12N生物组织全自动脱水机：湖北孝感医用仪器有限公司；BM-VII生物组织包埋机及冷冻机：湖北孝感医用仪器有限公司；CS-VI摊片烤片机：湖北孝感医用仪器有限公司；RS-18生物组织全自动染色机：湖北孝感医用仪器有限公司；RM2135轮转切片机：德国LEICA公司；OLYMPUS BX41荧光成像系统显微镜：奥林巴斯。 1.2方法 1.2.1 S