微生物实验技术（一）.pptVIP

微生物实验技术（一） 一、显微镜技术 光学显微镜技术 普通光学显微镜技术 相差显微镜技术 荧光显微镜技术 电子显微镜技术 1.普通光学显微镜技术（light microscopy） 结构 光学放大系统：物镜（油镜、高倍镜和低倍镜）和目镜（10×、16×） 照明系统：光源、反光镜和聚光器 机械和支架系统 分辨率 分辨率：指区分开两个质点间的最小距离。 D = 0.61λ/ (n·sinθ) D：分辨率 λ：波长 n：物镜与物体间介质折射率 2θ：物镜镜口角 N.A：即n·sinθ，数值孔径 2θ最大值 = 140℃，空气中n = 1，最短的可见光波长λ = 450nm，分辨率D = 292nm，约0.3um 油镜：n = 1.52，D = 0.2um 普通光镜的最大分辨率D = 0.2um 2. 相差显微镜技术（phase-contrast microscopy） 相差显微镜与普通显微镜的区别： 在物镜后装有一块“相差板”，偏转的光线分别通过相差板的不同区域，由于相差板上部分区域有吸光物质，使两组光线之间增添了新的光程差，从而对样品不同密度造成的相位差起“夸大”作用。最后这两组光线经过透镜又会聚成一束，发生互相叠加或抵消的干涉现象，表现出肉眼可见的明暗区别。 相差显微镜将光程差