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不同来源精子ICSI妊娠结局的初步探讨 　　【摘要】目的：探讨不同来源精子行卵胞浆内单精子注射（ICSI）的治疗结局。方法：回顾性分析2007年9月至2013年4月在我院行ICSI治疗的3398个新鲜移植周期。根据精子来源不同分为三组：射精组（A组），经皮附睾抽吸取精（PESA）组（B组），睾丸切开取精（TESE）组（C组） 。比较A、B、C三组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、流产率、宫外孕率和早产率，同时评估三组新生儿的低出生体重（LBW）率和出生缺陷的发病率。结果：A、B、C组的入选患者数分别为2726个、409个、263个；C组的受精率（770%）、卵裂率（966%）显著低于A组（812%与977%）和B组（808%与982%），均为P005）。结论：采用不同来源精子行ICSI可获得相近的妊娠结局，未额外增加子代出生缺陷的风险。 　　【关键词】 卵胞浆内单精子注射；经皮附睾抽吸取精；睾丸切开取精；妊娠结局；出生缺陷 　　【中图分类号】R711.6【文献标志码】A 　　有文献报道全球约15%的不孕不育夫妇中50%左右由男性因素引起[1]。自1992年卵胞浆内单精子显微注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）[2]问世以来，解决了多数男性不育及常规体外受精（IVF）失败患者的妊娠问题。1993年Schoysman等[3]报道了无精子症患者应用睾丸精子行ICSI获得成功。此后，经皮附睾抽吸（percutaneous epididymal sperm aspiraton， PESA）、睾丸切开取精（testicular sperm extraction， TESE）行ICSI已作为梗阻性无精子（OA）或非梗阻性无精子（NOA）及射精障碍患者的常规有效治疗方法。为了进一步了解不同精子来源是否会影响ICSI的临床结局及子代安全性，我们回顾性分析了我院应用不同来源精子行ICSI治疗后的胚胎发育情况和妊娠结局。 　　1资料与方法 　　11研究对象 　　2007年9月至2013年4月在我院因男性因素不育接受ICSI治疗的3398个新鲜移植周期纳入本研究。根据所用精子来源差异分三组，射精组（A组）：男方为重度少、弱、畸形精子症，或者取卵日精液处理后密度小于20×106/mL，共2726个周期；PESA组（B组）和TESE组（C组）：男方诊断为梗阻性或非梗阻性无精子症，行诊断性附睾或睾丸活检可见成熟精子，分别为409个周期和263个周期。无精子症为至少经3次离心镜检精液未见到精子（除外不射精和逆行射精）。 　　12方法 　　121卵巢刺激及取卵采用我中心常规长方案、短方案或拮抗剂方案控制行卵巢刺激，当至少有2个优势卵泡直径达到20mm，并结合雌激素的水平，肌注绒毛膜促性腺激素（HCG，5000IU/支） 1～2支，36～38h后在B超引导下经阴道后穹隆穿刺取卵。卵子孵育4h左右去除卵冠丘复合物外的颗粒细胞，MⅡ期卵子待行ICSI。 　　122精子获取常规射精组患者取卵前禁欲3～7d，取卵当日采用手淫方法留取精液标本，应用直接混合离心或密度梯度离心法处理精液，收集活动精子待行ICSI。PESA组患者取卵日在局部麻醉下行经皮附睾精子抽吸术，将附睾固定于阴囊皮下，用预先抽进少量培养液的1mL BD注射器穿刺附睾头并负压抽吸，直至针管内有淡黄色混浊附睾液体抽出，倒置显微镜下镜检有无活动精子，有活动精子行混合离心法处理，无活动精子可行对侧附睾抽吸。如双侧附睾穿刺均无活动精子，则改行TESE术。TESE组患者于局部麻醉下，在阴囊皮肤做一个小切口，穿过腹膜鞘膜在白膜上做一个或多个小切口，切取一块睾丸组织放入1006培养液（美国 Quinn’s产品）中 ，在解剖显微镜下用两支1mL BD注射针撕碎睾丸组织，在倒置显微镜下检测有无精子。将检测到精子的睾丸组织悬液混合离心或微量密度梯度离心制成精子悬液，放入37℃培养箱内孵育待行ICSI。TESE镜检见不活动精子，经孵育后常能获得活动精子。 　　123受精、早期胚胎评估及妊娠判定ICSI后16～18h观察受精，正常受精卵可观察到双原核和两个清晰或碎裂的极体，取卵后第3d观察胚胎卵裂，根据卵裂球的数目，均一性，胞浆及碎片比例予以评分，选取1～2个最优质胚胎行取卵后第3d移植，并给予常规黄体支持。移植后14d测血HCG，阳性为生化妊娠，移植后35d B超监测显示妊娠囊及胎心搏动为临床妊娠，临床妊娠包括宫内妊娠和宫外妊娠。124妊娠结局及新生儿随访随访妊娠有无并发症，分娩时间和方式，新生儿的性别、体重及有无出生缺陷。流产是妊娠不足28周而终止者；宫外孕为受精卵在子宫体腔以外着床，包括宫内外同时妊娠；早产是妊娠满28周不足37周间分娩；低体重儿是指新生儿出生