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《动物生物化学实验》教学大纲 一、基本信息 课程名称 动物生物化学实验? 课程编号 1712018 英文名称 Experiment of Animal Biochemistry 课程类型 必修课 总学时 27 学分 1.5 实验项目数 9 验证性实验个数 3 综合性实验个数 4 设计性实验个数 2 预修课程 有机化学、无机化学等 适用对象 动物医学、动物药学、强化班 课程简介 “生化实验课程”是为动物学科类，如动物医学、动物药学、动物科学和水产养殖等专业本科生设置的一门专业基础课。课程包括理论和实验两大部分。理论部分包括各种层析法、电泳法、色谱和生物大分子制备等重要生物化学实验技术的有关理论；实验部分包括糖类、蛋白质、核酸、酶及其它代谢物的提取、分离、纯化、分析和鉴定技术，也引进一些新近发展起来的、重要的生物化学及分子生物学研究方法和技术。课程突出动物科学的特点，要求学生不仅掌握有关电泳，色谱，制备，透析等基本的生化实验手段，熟悉常用生化仪器的原理和使用，而且必须搞清弄懂有关技术所涉及的物理、化学和生物学方面的理论知识。 二、教学目标及任务?? 《动物生物化学》是为高等农业院校动物医学、动物药学、动物科学和水产养殖等专业本专科开设的重要的专业基础课，也是一门重要的实验性课程。通过本课程的系统学习和实验，使学生掌握动物生化实验的基本知识,基本理论和基本实验技能,掌握熟悉常用生化仪器的原理和使用方法,了解有关电泳，色谱，制备，透析等基本的生化实验手段,培养理论联系实际的学风和动手能力。 三、学时分配 教学课时分配 序号 实验内容 学时 实验一 实验基本教育和基本操作训练 蛋白质的沉淀反应和两性反应，蛋白质透析脱盐 3 实验二 蛋白质的定量分析------双缩脲法测定蛋白质浓度 分光光度计的使用和注意事项 Excel软件制作标准曲线 3 实验三 动物心脏、肝脏中琥珀酸脱氢酶的制备和活性鉴定 动物血清和组织匀浆液的制备 附：玻璃匀浆器、离心机的使用 3 实验四 电泳的概念和一般原理 醋酸薄膜电泳分离血清蛋白* 电泳分离条带的扫描及软件分析 3 实验五 盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白* 3 实验六 层析的概念、分类和机理 分子筛凝胶过滤分离血红蛋白和核黄素# 3 实验七 动物肝脏DNA的提取及纯度鉴定* 低温离心机、紫外分光度计的使用及注意事项 3 实验八 钨酸法无蛋白血滤液的制备 Folin-W法全血中葡萄糖的测定* 3 实验九 吸咐层析的原理及操作方法 脂质的提取----索氏抽提器的使用方法 蛋黄油中的脂质成分薄层层析# 3 合计 27 四、实验内容及教学要求? 实验一： 蛋白质的沉淀反应和两性反应，蛋白质透析脱盐。 本实验重点、难点：生化实验常用的仪器的使用；理解蛋白质的一般理化性质；盐析、透析的概念。 本实验教学要求： 教育学生对生化实验的认识；了解生化实验常用的仪器及使用方法；理解蛋白质的沉淀、两性反应及透析脱盐的原理；掌握蛋白质盐析和透析等操作技术。 实验二： 蛋白质的定量分析------双缩脲法测定蛋白质浓度；分光光度计的使用和注意事项；Excel软件制作标准曲线。 本实验重点、难点： 分光光度法测定蛋白质的浓度的原理；标准曲线的制作。 本实验教学要求：了解蛋白质含量测定的原理和方法；掌握分光光度法的原理及分光光度计的使用方法和注意事项；用标准曲线法准确测定未知样品中蛋白质的含量；学习使用Excel软件制作标准曲线。 实验三： 动物心脏、肝脏中琥珀酸脱氢酶的制备和活性鉴定*；动物血清和组织匀浆液的制备；附：玻璃匀浆器、离心机的使用。 本实验重点、难点：制备血清和组织匀浆液；观察琥珀酸脱氢酶竞争性抑制的基本原理；玻璃匀浆器、离心机的正确使用。 本实验教学要求：了解琥珀酸脱氢酶竞争性抑制的实验原理；掌握动物血清和组织匀浆液的制备，匀浆器、离心机的使用等方法。 实验四： 电泳的概念和一般原理；醋酸薄膜电泳分离血清蛋白；电泳分离条带的扫描及软件分析*。 本实验重点、难点： 电泳的概念和一般原理； 电泳分析动物血清中各种蛋白组分。 本实验教学要求：了解电泳的概念和一般原理；掌握醋酸纤维薄膜电泳的操作技术和操作要点；学会用电脑软件分析动物血清中各种蛋白组分 实验五： 盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白*。 本实验重点、难点：盘状不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术和操作要点 本实验教学要求：了解聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和优点；掌握盘状不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术和操作要点；比较醋酸纤维薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白的异同和优缺点。 实验六： 层析的概念、分类和机理；分子筛凝胶过滤分离血红蛋白和核黄素#。 本实验重点、难点： 层析的概念、分类。凝胶层析的一般原理； 凝胶过滤柱层析分离血红蛋白和核黄素的