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国内真菌临床检验技术研究进展 　　【摘要】真菌感染是近年来新出现的一种新型的临床常见疾病。由于近几年来医学方面的研究力度逐渐增大，同时研制出很多的新型的治疗方法，其中真菌治疗便是具有代表性的一种。然而，随着真菌治疗使用的广泛普及，真菌引起的感染疾病也越来越多，这一现象引起了很多人的极度关注。 　　【关键词】真菌感染；临床检验；生化检验 　　【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）05-0703-01 　　前言：真菌感染疾病的临床治疗手段比较单一、缺乏有效药物，因此早期诊断、及时检出对提高治愈率、降低死亡率至关重要。而最重要的是，真菌感染的临床治疗是医院临床检验中最薄弱的一个环节，并且它得到的重视程度远远不够，专业从事这个行业的专业人员又少，所以导致现如今真菌感染疾病临床治疗手段不够完善的局面，因此，我们应当更加重视真菌感染疾病的临床治疗。 　　1临床致病真菌的分类 　　临床致病真菌按形态学主要分为3大类群：酵母菌、霉菌以及双相型真菌。这些真菌按致病部位可以分为浅部真菌和深部真菌。引起浅部感染的多为霉菌，引起深部感染的多为酵母菌和双相型真菌，也有少数霉菌（如曲霉菌、毛霉菌、青霉菌等）。 　　2我国真菌感染疾病的临床治疗技术的现状 　　目前临床常用的真菌检验方法习惯上分为培养法和非培养法两种，主要包括形态学观查、生化指标检测以及分子生物学测试等。有关真菌临床检验的一般方法以及国外在相关生化、分子生物学检验方面的研究进展，已有数篇简短的综述。 　　由于受到工作条件、研究条件和人员素质等多方面的限制，国内对于临床真菌检验方法学的研究相对薄弱，但国内同仁从来没有停止对相关领域的探索。尤其值得指出的是，由于国内研究完全基于我国现有的临床检验条件，因而工作的开展更有针对性，结果也更有借鉴意义。 　　3近几年专家研究出的临床治疗手段 　　3.1临床治疗技术之一――形态学观察 　　形态学观察法主要包括直接镜检法和培养法两种最经典的检验方法。直接镜检法包括湿片镜检和干片镜检两种方法，是一项简易快速有效的方法。在皮肤科检查、妇科检查、排泄物检查及胸腹水、脑脊液等危重病患者医院内感染的深部真菌病的监测中是快速作出初步诊断的重要手段，但常规检查法检出率甚低，造成诊断上的困难。采用多次制片、重复检测的方法，可以弥补方法学上的不足，大大提高真菌检出率。 　　培养法是金标准，分为大培养法和小培养法，可提供真菌的耐药特征，相对简单易普及，是目前应用最广的方法。大培养适用于血液、骨髓、脑脊液、胸腹水等无菌部位的体液的真菌培养，主要的培养基有液体沙氏培养基，脑心浸液培养基及各类商品的血液培养仪专用的培养基；小培养主要用于痰、脓液、组织、粪便、毛发，口、咽、耳、阴道等部位各类型的标本，有沙氏平斜面、改良沙氏培养基，TYC沙堡罗培养基、CHROMagar念珠菌显色培养基，及用于真菌分离的蔡氏培养基（用于曲霉菌、青霉菌、毛霉菌）、麦芽浸膏培养基（用于毛霉菌）、马铃薯葡萄糖培养基（用于暗色孢科）、以及用于双相型真菌转相试验的脑心浸液琼脂培养基等。培养法有阳性检出率高、结果准确可靠的优点，但操作繁琐、耗时长，不利于快速作出诊断。使用CHROMagar念珠菌显色培养基在真菌分离培养的同时即可鉴定，可缩短检测时间24～48 h，还可同时检测到念珠菌的混合感染，其真菌类型分离的阳性率与传统的沙保弱培养基相同；但有一些念珠菌使用YBC卡能够鉴定至种，而在CHROMagar显色培养基中无法做到，同时，CHROMagar显色培养基对细菌的抑制率（1.2 %）明显低于沙堡弱培养基（9.9%）。培养法中使用的YBC卡、MicroScan鉴定板及CANDIFAST试剂盒等，是基于不同真菌代谢过程中产生的不同代谢产物和特异性酶制作的成品显色试剂盒用于鉴定培养得到的真菌种类。从这个意义上来说，培养法也可以归类于生化检测法的范畴中。 　　将培养法与标本片制备相结合，在无菌载玻片上用一滴培养基作小培养，在观察到样本培养基中有菌丝或孢子出现后，立即干燥并用阿拉伯树胶固封于盖玻片的四周，可以得到能够长期保存的样品标本，直接进行镜检，是一种改良的小培养法。有研究表明，对于来自鳞屑、指（趾）甲、毛发等标本的浅部真菌的临床检测，运用马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）、沙堡氏琼脂及玉米粉葡萄糖琼脂培养得到的真菌阳性率（61.44 %）明显高于10%KOH涂片镜检法的阳性率（51.42 %）。在对直接镜检呈阴性的标本进行培养时，仍然得到21.08%的阳性率。因此，直接镜检为阴性的临床标本仍需谨慎对待。 　　3.2临床治疗技术之一――生化检测法 　　前面已经提到，真菌生长过程中会产生大量不同种类代谢产物和特异性酶。应用生化手段直接检测体液中相关