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公开课基因工程与其应用.ppt 47页

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* * * * * * EcoRI 识别序列 含有目的基因的一段DNA序列 (1)目的基因提取: 4、基因工程的操作步骤 目的基因 (1)目的基因提取 用同一种限制酶切割质粒,露出相同黏性末端。 EcoRⅠ 切割质粒: 目的基因 (2)构成重组质粒 重组质粒(重组DNA) (3)将目的基因导入受体细胞 常用的受体细胞及转化方法: 1)植物细胞:农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 2)动物细胞:显微注射技术(此方法常用的受体细胞多是受精卵) 3)微生物细胞: 微生物细胞常用做受体细胞的原因: 繁殖快、多为单细胞生物、 遗传物质相对较少。 常用的原核细胞:大肠杆菌和土壤农杆菌 常用的方法:转化感受态法 导入检测:DNA分子杂交技术(检测转基因生物的染 色体上的DNA是否插入了目的基因) (4)目的基因的检测和表达 表达检测: 1) 转录检测:探针法(检测目的基因是 否转录出了mRNA) 2)翻译检测:抗原-抗体杂交法(检测目的基因 个体生物学水平的检测:利用相应的性状检测。 是否翻译出了蛋白质)   处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 不能,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达。 受体细胞导入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗? 若不能表达,要对抗虫基因再进行修饰。 1、基因工程与作物育种 基因工程的应用: 抗虫玉米 抗虫转基因植物 蓝色妖姬 2、基因工程与药物研制 我国生产的部分基因 工程疫苗和药物   许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。   微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。   胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取3-4g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。   将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了50%-70%! 3、基因工程与环境保护   基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。   通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质。   利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。 转基因食品 安全吗? 转基因食品的安全性争论 支持派认为:如果转基因农业生物技术得不到社会支持,这一研究将被扼杀,并且强调,迄今为止并没有发现转基因食品危害人体健康和环境的确切证据。 美国人食用转基因食品已多年,超级市场上有4000多种商品是含有转基因植物成分的,还没有事例证明人吃了以后会得病,甚至会引起死亡。 加拿大、澳大利亚也是转基因食品的生产大国,均有几 千万人在吃,到现在为止也没有—个案例说明它有问题 。 反对派的观点: 一英国科学家声称,转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能; 美国康乃尔大学也发现,转基因玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境。 环保团体认为这种违反自然的转基因作物及产品,未经长期安全测试,长期食用可能对人类及生态环境造成负面影响。 尤其是注重环境和生态保护的欧盟国家,对转基因作物更加排斥,因而抵制美国GMO产品的进口。 ⒈要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是( )  ①限制酶   ②连接酶  ③解旋酶   ④还原酶   A.①②   B.③④  C.①④  D.②③ ⒉实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA分子的GAATTC顺序,切点在G和A之间,这是利用了酶的(  ) A.高效性      B.专一性    C.多样性      D.催化活性易受外界影响 A B 随 练习 3.(2007

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