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大鼠主动脉前庭自发慢电位电生理基础研究 　　大鼠主动脉前庭部位存在自律细胞，其电位特征与窦房结优势起搏细胞和潜在起搏细胞电位相似。为了进一步阐明该部位自律细胞慢反应电位0相和4相去极化的离子基础，本实验应用常规的玻璃微电极细胞内记录技术，用离子通道阻断剂，初步分析了主动脉前庭部位慢反应自律细胞0相和4相的去极离子流。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 成年大鼠10只，由漯河医专科实验动物中心提供。 　　1.2 动物手术及电刺激方法 击脑致昏后迅速开胸取出心脏，置于O2饱和的Locke液中。制好的标本用不锈钢针固定于灌流槽内的硅橡胶上，用改良的Locke液以10 ml/min进行恒速灌流，温度维持在36℃左右，灌流液中充以纯O2， pH 7.4。标本在灌流液中稳定30 min后开始实验。刺激时间由数秒至数分钟不等，直至诱发出稳定的自发节律，再停止电刺激。自发节律稳定后开始实验。动作电位经DWF-3型微电极放大器放大后，一路输入SBR-1型示波器进行观察，一路输入监听器监听，另一路经高速模数转换器输入微机，自动显示电信号，并分析动作电位的各项参数指标[1]。 　　1.3 观测指标 最大舒张电位（MDP）、动作电位幅值（APA）、0相最大除极速度（Vmax）、4相自动除极速度（ VDD）、复极至50%和90%时间（APD50 and APD90）和自发放电频率（RPF）。 　　1.4 实验过程和分组 待自发节律稳定10 min后开始采集一组正常的慢反应动作电位作对照，然后改用其它灌流液灌流，记录每次灌流后的动作电位变化。实验分为： ①015Lmol/L尼索地平（Nis）组（n=6）； ②112 mmol/L河豚毒（TTX）组（n=6）；③2 mmol/L 4-氨基吡啶（4-AP）组（n=8）； ④115mmol/L的CsCl组（n=8）； ⑤低氧无糖组（n=6）；⑥用Glibenclamide （Gli）预处理10 min后再用无糖液（含Gli）灌流组（n=6）。 　　1.5统计学方法 采用SPSS 20.0版医学统计软件，动作电位的各观测指标以 x±s表示，组间比较用t 检验，以P0.05为具有显著性统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 Nis对主动脉前庭部慢反应电活动的影响 用0.5Lmol/L Nis灌流后1 min， VDD和RPF开始下降， 5 min时APA、Vmax也开始减小， RPF继续下降；当灌流10 min时， APA、Vmax、VDD和RPF与正常相比P0.01。MDP和APD无明显改变。 　　2.2 TTX对主动脉前庭慢电位的影响 用1.2mmol/L河豚毒灌流1min时， APA、Vmax、VDD和RFP开始降低， 5min时由灌流前的（53.7±2.8）mV、（11.4±1.2）v/s、（32.3±2.4）mV/s和（176±9）bmp分别变为（50.5±1.6）mV、（9.3±0.6）v/s （23±114）mV/s和（108±7）bmp， APA和Vmax与对照相比P0.05，VDD和RFP与对照相比P0.01。 　　2.3 4-AP对主动脉前庭慢反应电位的影响 用2 mmol/L4-AP灌流5 min时， MDP、APA、Vmax减小，由灌流前的（-54.8±3.2）mV、（54.6±2.8）mV和（10.2±2.3）v/s分别变为（-33.6±2.7）mV、（30.5±2.8）mV和（6.7±1.5 ）v/s，VDD和RPF明显加快，由灌流前的（33±2.7）mV/s和（155±17）bmp分别变为（37.0±3.9）mV/s和（183±8 ）bmp，与正常对照相比有显著差异（P0.01）；APD90延长，由正常时的159.1±7.6ms变为（174±8.7）ms，与正常对照相比有显著差异（P0.05），灌流10 min时各指标稳定于此水平。 　　CsCl对主动脉前庭慢反应电位的影响，用1.5 mmol/L CsCl灌流5 min时， VDD和RPF与灌流前相比明显减慢（P0.05），由灌流前的（32.0±2.5）mV/s和（165±8）bmp变为（27.6±1.4）mV/s和（146±8）bmp，其余指标无明显改变，灌流10 min时VDD和RPF又恢复正常。 　　低O2时主动脉前庭自发慢反应电位的变化 　　用无糖低氧液灌流5min时，MDP、APA、Vmax和VDD显著降低（P0.05），RPF似有增加，但与正常对照比无显著差异。灌流10min时MDP、APA、Vmax和VDD仍低于正常对照，由正常时的（-53.7±1.5）mV、（52±1.9）mV、（10.9±0.7） v/s和（32.7±1.7）mV/s分别变为（-42.9±1.9）mV、（42.4±