利用F2A连接IL24和GMCSF双基因溶瘤痘苗病毒的靶向性及抗癌的研究（可编辑）.docVIP

利用F2A连接IL24和GMCSF双基因溶瘤痘苗病毒的靶向性及抗癌的研究 浙江理工大学硕士毕业论文利用卜连接和双基因溶瘤痘苗病毒的靶向性及抗癌研究 浙江理工大学学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外, 论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。也不包舍为获 得浙江理工大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与 我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名:笫系焙 日期:。伊弓年弓月莎日浙江理工大学硕士毕业论文 利用连接和双基因溶瘤痘茁病毒的靶向性及抗癌研究 学位删蒯圳删川嘲螋 本学位论文作者完全了解逝逛理墨太.堂有杉保留笋争重 家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘,身:许哆。孑歹 查阅和借阅。本人授权堂望堡王太堂可以将学位论当台手 或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以象彰, 印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 保密的学位论文在解密后适用本授权书 学位论文作者签名: 梁余若球荦培 签字日期: 年月 导师签名: 签字曰期:加倍年 :.一。 Ⅱ浙江理工大学硕士毕业论文利用连接和双基因溶瘤痘苗病毒的靶向性及抗癌研究 摘要 癌症严重威胁人类健康和生命,靶向性病毒.基因疗法为癌症的治疗提供了一种新策 略。载体的选择是癌症基因治疗的关键所在。基因组容量大、复制快、表达效率高、免疫 原性强、安全性高等是痘苗病毒所具有的特点,正因为有这些特点,它可以作为理想的基 因治疗载体。 是一种广谱的抗肿瘤基因,它能直接诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤的血管发生 而对正常细胞无影响,此外,它还能刺激细胞的增加,发挥免疫修饰的功能。作为一 种多功能的细胞因子,.既能刺激巨噬细胞、树突状细胞与粒细胞的增殖分化;也 能对机体抗肿瘤免疫功能有增强作用。肿瘤的成因通常与细胞的多种基因突变有关,因而 对肿瘤进行有效的基因治疗应是多种外源基因对肿瘤进行多靶点的抑制。理论上双基因治 疗策略要远比单基因治疗策略彻底和有效得多,然而最关键的问题是缺少一种理想的连接 子,使其能够有效地表达双基因。在这方面己经做过很多尝试,比较典型的是利用核糖体 进入位点作为连接工具。自身具有庞大的序列结构以及其上下游基因表达 水平不平衡限制了它在双基因治疗中的广泛应用。为有效地实现双基因的共表达,本研究 采用了一种新的连接子即.。 本研究应用分子克隆通过.连接子将和两个基因连接并置于痘苗病 毒载体系统上构成靶向性双基因溶瘤痘苗病毒...。 与病毒滴度测定结果显示改造的溶瘤痘苗病毒在癌细胞中有高效的选择复制能力。体外 实验初步表明,?..相对于单基因对照病毒治疗来说取得更 好的效果。为进一步运用痘苗病毒作为载体的靶向基因.病毒治疗癌症奠定了坚实的基础。 关键词:靶向基因.病毒治疗,,,.,溶瘤痘苗病毒 . .曲. , . , . , ,. .. . . ,. .. 略 ., . , ???? ... ?, . . : ? ,,一, 浙江理工大学硕士毕业论文利用连接和双基因溶瘤痘苗病毒的靶向性及抗癌研究 缩略词 浙江理工大学硕士毕业论文利用卜连接和双基因溶瘤痘苗病毒的靶向性及抗癌研究 目习℃ 摘要??Ⅳ .?.. 缩略词? 弓言??. .癌症治疗的研究现状. .溶瘤痘苗病毒的介绍. .. 痘苗病毒的生物学特点 ..重组痘苗病毒载体的特点?。 ..溶瘤痘苗病毒的改造一 . 基因概述. . 基因概述?.. .双基因表达载体比较以及连接子的概述.. 口蹄疫病毒 .?. .. 的“剪切”机制??. .本课题研究介绍?。。 实验材料与方法??. . 实验材料??. ..菌株和质粒..病毒? ..实验试剂与工具酶?.. ..抗体??...? .. 引物设计与合成 ..细胞株.. ..主要的仪器与设备?.. ..主要溶液配制? .实验方法.. 分子克隆部分. ...分子克隆常用的方法及步骤?。 ...质粒的构建. ...质粒.的构建.. ...质粒的构建??.. ...质粒..的构建? ..痘苗病毒构建部分:重组溶瘤痘苗病毒的包装,筛选,鉴定,挑取空斑,扩增及病毒 滴度的测定., ...重组溶瘤痘苗病毒...., ?,的包装...重组溶瘤痘苗病毒.的筛选与空斑挑取 ... 重组溶瘤痘苗病毒.的鉴定...重组溶瘤痘苗病毒.的扩增与滴度测定 ..体外实验对重组痘苗病毒的复制靶向性及抗癌研究... 检测重组溶瘤病毒...与对照病毒 携带外源基因的表达水平. ...溶瘤痘苗病毒靶向复制能力分析??. 浙江理工大学硕士毕业论文利用连接和双基因溶瘤痘苗病毒的靶向性及抗癌研究 ... 检测溶瘤