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大蒜根尖细胞分裂装片制作技巧 　　【摘要】装片制作能提高学生的探索兴趣和认识世界的能力，本文就大蒜根尖的培养、取材时机和固定保存、解离与漂洗、染色、压片等的一些技巧做了些经验上的总结，希望能给大家提供参考。 　　【关键词】培养温度；取材时机；分裂相；解离；染色 　　一、制作大蒜根尖细胞分裂装片的意义 　　1.实验在科学教学中的重要作用 　　实验是科学教学的重要手段，广泛应用于物理、化学、生物等学科教学中。它在激发学生探索兴趣、培养学生创新意识、创新精神等方面有重要作用，是科学研究启蒙教育的重要途径。要开展实验，教师必须提高自身的实验能力，在教学活动中通过对学生的实验指导，培养学生的探究兴趣，逐步形成创新意识和创新能力。因此，教师应该具备一些基本的实验技能。 　　2.装片制作能提高学生的探索兴趣和认识世界的能力 　　初中科学教科书中，要求学生会做简单的装片。如：口腔上皮细胞装片、洋葱表皮细胞装片等。对于有爱好的同学，我们可以给以专门的指导。细胞分裂装片的制作是老师需要掌握的，我们可以把这个实验教给兴趣小组，提高他们的学习兴趣和专业技能。 　　二、制作过程 　　由于大蒜根尖分生区细胞分裂活跃，所以把大蒜根尖作为材料来观察细胞分裂，对我们学习和认识细胞分裂很有帮助。现在我把大蒜根尖细胞分裂装片的制作的经验及基本过程介绍如下 　　（一）大蒜根尖的培养 　　1.实验材料：大蒜比洋葱实验效果更好 　　选用洋葱和大蒜作为试验材料，在18 ℃左右的恒温箱中培养，发现洋葱非常容易坏，且生根量极少。大蒜几乎不坏，且一个蒜瓣的生根量就相当于一个洋葱的生根量，因大蒜的蒜瓣之间有空隙，不易缺氧，避免因缺氧造成的腐烂现象。另外大蒜的染色体数为16，在观察染色体时候也比较方便。 　　2．培养温度：2 ℃左右效果最好 　　对大蒜的根尖分别作-2 ℃、0 ℃、2 ℃、4 ℃、6℃、8℃的24h 低温根尖培养。在低温处理中，- 2 ℃或0 ℃处理后，镜检时发现几乎无细胞分裂现象， 2 ℃时,只有少数细胞处于分裂期，且分裂时期不明显，4 ℃时，不仅积累了很多前、中、后、末期的细胞，而且染色体比较粗短，典型的分裂相大增，在分生区内，平均每个视野中少则能观察到3～4 个分裂相，多则可见十几个分裂相，6 ℃时分裂期细胞数目减少，8℃时分裂期细胞数目比6 ℃时更少。 　　3.培养时间：根尖长到0.5-1cm后取材较好 　　用大蒜作为实验材料，等根尖长到0.5-1cm后就可剪取0.3cm进行实验，这样就能大大缩短培养时间，并且实验效果也好，因为幼根的根尖细胞分裂更加旺盛，并且显微镜下也容易区分。如果按照一般实验时间，不仅培养时间长，而且根尖的剪取长度也很难把握。 　　（二）取材时机和固定保存 　　取材时机最好是中午11：00 点～14： 00 点时取材较好 　　本实验对材料的要求是最好用分裂相多的材料作为实验材料。通过对早6：00 点～晚22：00 点之间的不同时段做对比实验得出：在23～28 ℃温度下，中午11：00 点～14：00 点时取材最好，观察到的分裂相最多，其它时间段相对较少。 　　由于不能保证在必要时根尖正处于分裂相最多的时期，这就需要把处在细胞分裂旺盛期的根尖随时取下来，进行固定处理。具体有以下两种操作方法： 　　把剪取的根尖放入卡诺固定液（纯酒精：氯仿：冰醋酸=12：6：2）中固定1h，然后把根尖保存在70%酒精中。 　　（三）解离与漂洗 　　将固定以后的根转入盛有15%HCl溶液的试管中，再将试管放入盛有60°C-65°C的水溶液中解离约3min。 　　解离后的根尖，必须漂洗干净，以便能够着色。而一般的漂洗时间为10min。为缩短时间，可以将解离后的根尖放入盛有清水的小烧杯中，用玻璃棒不断搅拌，使根尖上附着的盐酸加速溶解，约2-3分钟后，再将根尖放入另一盛有清水的水洗杯中，漂洗一下即可。 　　（四）染色 　　在实验中发现质量浓度为0. 01g/ mL 的龙胆紫染液易把根尖都染成深紫色，较难观察清楚有丝分裂各时期和染色体行为变化，因此我们将质量浓度为0. 01g/ mL的龙胆紫染液进行稀释。因为醋酸能加强细胞核染色体的选择着色，所以我们选择用冰醋酸进行稀释，通过对几种不同浓度的稀释液(50%冰醋酸、20%、10 %冰醋酸、4 %冰醋酸)进行不同浓度的稀释比较，最后得出：用10 %的冰醋酸以3 :1的比例稀释后染色效果最好。 　　（五）压片 　　为了减少细胞重叠，保证压片的质量，对于较粗的根尖不宜直接压片，最好是把较粗的根尖纵切成2～3 片再压片。可以用双面刀片在萝卜上割一个根尖长短相当的缝隙，然后用镊子把根尖放入其中，再用左手压紧，右手用刀片把根尖纵切成2～3 片，经纵切后的根尖压片效果非常理想。不