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大鼠原位肝移植模型建立技术要点
大鼠原位肝移植模型建立技术要点
摘要:目的探讨大鼠肝移植手术技巧与处理要点, 减少术后并发症,建立稳定的大鼠肝移植模型。方法Wistar大鼠240只(供受体各120只)行二袖套法原位肝移植。结果120例大鼠原位肝移植术后48小时存活率88.3 % ,1周存活率86.7%,建立了稳定的大鼠肝移植模型。结论掌握技术要点与处理方法,是建立稳定的大鼠肝移植模型的保证。
关键词:肝移植; 大鼠; 模型
The Technical Points of Orthotopic Liver Transplantation in Rats
LIU Yao-juan1,CHAI Jun-wu2,WANG Hui2,JIANG Wen-tao2,ZHENG Hong1
(1.Department of Nuclear Medicine,The First Central Hospital of Tianjin City,Tianjin 300000,China; 2.Organ Transplant Center,The First Central Hospital of Tianjin City,Tianjin 300000,China)
Abstract:ObjectiveTo explore the surgical skills of Orthotopic Liver Transplantation in Rats and reduce the complications. MethodsOrthotopic Liver Transplantation was performed in 240 rats using two-cuff technique.ResultsThe survival rate for 48 hours was 88.3 %, the survival rate for one week was 86.7 %, and established stable liver transplantation model in rats. ConclusionMaster the surgical skills of Liver Transplantation in rats can improve achievement ratio and the steady livability of rats with orthotopic liver transplantation.
Key words:Liver transplantation;Model;Rats大鼠原位肝移植是研究免疫耐受、免疫排斥、器官保存、肝脏缺血再灌注损伤等方面常用动物模型,1979年Kamada首次提出了二袖套法建立大鼠肝移植模型,简化了手术方式,提高了生存率[1]。我们在实验前期完成20例预实验,正式实验完成120例大鼠原位肝移植,建立了稳定的大鼠肝移植模型。
1材料与方法
1.1 实验动物健康雄性Wistar大鼠,清洁级,体重为250-300g,北京军事科学院动物实验中心提供。实验器材:显微器械包(上海金钟医疗器械厂提供),7/0带线缝合针等。门静脉套管、肝下下腔静脉套管、胆管吻合支架管分别由中空塑料棉签、头皮针套管、硬膜外导管拉制而成,内外径分别为2.50、1.80,3.20、2.70,0.90、0.70mm,门脉、腔静脉套管长度为(3.0 +0.15)mm,胆管支撑管长度为(4.0+0.5)mm。
1.2方法单人裸眼二袖套法行原位肝移植,供受体术前禁食6小时,自由饮水。
1.21 供体手术5%水合氯醛腹腔注射麻醉(300mg/kg)。腹部纵切口,拉勾向四角拉伸,背部垫腰桥。剪断肝圆韧带和左三角韧带,近肝上下腔静脉(IVC,inferior vena cava)结扎左膈下静脉,游离尾状叶,结扎肝食管静脉丛。游离肝下IVC,7/0滑线结扎离断右肾静脉。经腰静脉2ml生理盐水(含肝素100U)全身肝素化。游离门静脉,7/0滑线结扎离断幽门静脉和脾静脉、肝动脉,胆管下挂线,胆管壁减斜切口,插胆道支撑管。1~4℃乳酸林格液(肝素浓度为25U/ml)经肠系膜上静脉重力灌注(50~60滴/min),剪断肝下IVC,肝脏变为土黄色,灌注3分钟后换无肝素的林格液灌注1min。离断肝食管静脉丛、肝动脉、胆管、肠系膜上静脉,近肝脏结扎并离断右肾上腺静脉与腰静脉的共干。取下肝脏置于1~4℃林格液中。
1.22供肝修整:剪去肝下IVC周围和肾静脉结扎处附着组织,参照Kamada[1]袖套法将肝下IVC和门静脉翻套在相应套管上,肾静脉和脾静脉结扎线作标记,保证静脉腔通畅,7-0线结扎。小牵线夹夹闭肝下
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