大鼠口服芍苓消银片后血液中芍药苷落新妇苷迷迭香酸异嗪皮啶甘草苷药物动力学研究.docVIP

大鼠口服芍苓消银片后血液中芍药苷落新妇苷迷迭香酸异嗪皮啶甘草苷药物动力学研究 　　[摘要] 芍药苷?落新妇苷?迷迭香酸?异嗪皮啶和甘草苷为芍苓消银片中主要成分，为给其后期剂型及临床用药方案设计奠定基础，该文建立了这5种成分血药浓度含量测定方法并进行大鼠体内药物动力学的研究?血药浓度测定采用HPLC测定，菲罗门C18色谱柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm），甲醇-乙腈-0.05%甲酸梯度洗脱，流速0.8 mL?min-1，检测波长275 nm?样品处理采用固相萃取法?大鼠灌胃芍苓消银片浸膏后分别于不同时间采血，测定血药浓度?实验结果显示5种成分可基线分离，芍药苷?异嗪皮啶?落新妇苷?迷迭香酸和甘草苷分别在2.48～248， 0.213 6～21.36， 0.531～53.1，0.704～70.4，0.253～25.3 mg?L-1线形关系良好?5种成分均可吸收入血，均为快速吸收?快速消除的模式?该文建立的方法快速?准确，可用于含同类成分的制剂的体内分析，芍苓消银片中主要成分吸收消除较快，适合制备成缓控释制剂，普通制剂可能需要1 d服药4～6次? 　　[关键词] 芍药苷；异嗪皮啶；落新妇苷；迷迭香酸；甘草苷；芍苓消银片；药物动力学 　　[收稿日期] 2014-01-13 　　[基金项目] 广东省自然科学基金项目（S2013030011515）；广东省科技厅-广东省中医院联合专项项目（2011B032200009）；广东省中医院项目（YK2013B1N11） 　　[通信作者] 卢传坚，E-mail：luchuanjian@ 　　芍苓消银片（银屑灵优化方）为正在开发中的新药，由赤芍，土茯苓，肿节风，甘草等药物组成，具有活血化瘀?养血活血?化瘀通络的功效，主要用于治疗血瘀型寻常性银屑病?芍药苷?落新妇苷?迷迭香酸?异嗪皮啶?甘草苷是方中赤芍?土茯苓?肿节风?甘草中的主要成分?为考察其是否可吸收入血发挥临床治疗作用，药物动力学特征适用于何种剂型，笔者建立了这5种成分体内分析方法，进行了大鼠体内的药物动力学研究? 　　1 材料 　　1.1 仪器 　　Agilent1200高效液相VWD检测器（美国安捷伦公司）；超低温冰箱（NEW BRUNSWICK英国）；BS224S电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；IKA涡旋震荡仪 （型号GENIUS3，德国）；白洋台式离心机（G20河北省安新县白洋离心机厂）；Waters20管型固相萃取仪（美国Waters公司）；Waters HLB固相萃取小柱（规格1cc/30 mg，美国Waters公司）；Milli-Q纯水机（美国Millipore公司）；ACURA 825移液枪（瑞士）? 　　1.2 试药 　　所有原药材均来自康美药业股份有限公司，芍苓消银片提取物由本实验室自制，芍苓消银浸膏相当于生药4.20 g?mL-1，浸膏中芍药苷?异嗪皮啶?甘草苷?落新妇苷?迷迭香酸含量分别为1.18， 0.56，1.87，5.05， 0.14 g?L-1?芍药苷?异嗪皮啶?甘草苷对照品均购自中国食品药品检定研究院，批号分别为110736-200934，110837-200304，111610-200604；落新妇苷?迷迭香酸对照品购自上海源叶生物科技有限公司，批号分别甲醇（色谱纯，批号333042，天津四友）；乙腈（色谱纯，批号90139，迪马公司）；甲酸（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）? 　　1.3 动物 　　健康雄性SD 大鼠，SPF级，体重（320±40） g，广东省医学实验动物中心提供，动物合格证号（粤）2008-1951，并通过实验动物伦理委员会审查? 　　2 方法 　　2.1 色谱条件 　　Phenomenex C18柱；流动相B甲醇，C乙腈，D 0.05%甲酸，梯度洗脱条件：0～5 min，B-C-D（20∶5∶75）～B-C-D（30∶5∶65）；5～10 min，B-C-D（30∶5∶65）～B-C-D（35∶10∶55）；10～20 min， B-C-D（35∶10∶55）～B-C-D（40∶10∶50）；流速0.8 mL?min-1；检测波长275 nm， 进样量10 μL? 　　2.2 血浆样品的处理 　　取血浆样品200 μL，加入等量的双蒸水，涡旋混匀，上样于活化后的SPE小柱，用1 mL双蒸水洗涤，弃去，最后用1 mL 0.1%甲酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱液；置于waters固相萃取仪中用空气气流吹干，残渣用200 μL 70%甲醇复溶，12 000 r?min-1离心3 min后，取上清液，进样10 μL分析? 　　2.3 对照品溶液的制备 　　取适量芍药苷，异嗪皮啶，甘草苷，落新妇苷