不同价态砷对大鼠砷代谢及甲基化生化指标的影响-劳动卫生与环境卫生学专业论文.docxVIP

新疆医科大学硕士学位论文 新疆医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 不同价态砷对大鼠砷代谢及甲基化生化指标的影响 研究生：师喆 导师：郑玉建 教授 指导老师：吴军 副教授 摘 要 目的：观察不同价态、不同剂量砷染毒大鼠代谢相关生化指标的活力及大鼠肝 脏中甲基转移酶 mRNA 的表达情况，寻找不同价态砷体内代谢间的差异，为进一步 探讨砷的毒作用机制提供依据。方法：选用 Wistar 大鼠 70 只，随机分为对照组，对 照组给予饮用去离子水，iAs3+高、中、低剂量组，分别给予 20.0、6.7、2.2mg/kg 的亚砷酸钠溶液，iAs5+高、中、低剂量组，分别给予 20.0、6.7、2.2mg/kg 的砷酸 氢钠溶液，共 7 组。采用自由饮水法染毒，连续染毒 90 d。大鼠饲养至第 3 个月末， 用颈椎脱臼法处死。应用酶联免疫吸附法(ELISA)测各组肝脏匀浆液中 SAM，ARR， MTR 的活力；酶联免疫吸附法测定血细胞中 PK 活力；实时荧光定量 PCR 测定各组 肝脏基因组中甲基转移酶 mRNA 的表达。结果：1.iAs3+和 iAs5+均可升高大鼠肝脏中 SAM 活力(P0.05)，且随着染砷剂量的增加，呈下降的趋势，相同剂量 iAs3+组 SAM 活力低于 iAs5+组，差别有统计学意义(P0.05)；2.iAs3+和 iAs5+可改变大鼠肝脏中的 ARR 活力，差别有统计学意义(P0.05)；iAs3+高、中剂量组与低剂量组比较，差别 有统计学意义(P0.05)，iAs5+高剂量组与低剂量组比较，差别有统计学意义(P0.05)； iAs3+和 iAs5+各剂量组间比较，差别均有统计学意义(P0.05)；3.MTR 可改变 iAs3+和 iAs5+大鼠肝脏中的活力，差别有统计学意义(P0.05)；相同受试物与低剂量组比较， 差别均有统计学意义(P0.05)；iAs3+和 iAs5+高剂量组间比较，差别有统计学意义 (P0.05)；iAs3+和 iAs5+低剂量组比较，差别有统计学意义(P0.05)；4.高剂量 iAs3+ 和 iAs5+可降低大鼠血清中 PK 活性，iAs3+和 iAs5+高剂量组中的比较差异有统计学意 义 (P0.05)，iAs3+和 iAs5+在中剂量组与低剂量组比较时差异均无统计学意义(P 均 0.05)；5.从荧光定量 PCR 的结果可见，iAs3+和 iAs5+在大鼠肝脏中甲基化转移酶 mRNA 的基因表达与正常对照组相比均有统计学差异 (P0.05)，随着染砷剂量的增 加，iAs3+As3MT 基因的 mRNA 表达呈上升趋势，iAs5+ As3MT 基因的 mRNA 表达呈 下降趋势，iAs3+和 iAs5+高剂量组比较差异有统计学意义(P0.05)；随着染砷剂量的增 加，iAs3+DNMT3A，3B 基因的 mRNA 表达呈下降趋势，iAs5+DNMT3A，3B 基因的 mRNA 表达呈上升趋势，iAs3+和 iAs5+高、低剂量组比较差异有统计学意义(P0.05)； DNMT1 基因的 mRNA 表达中 iAs3+和 iAs5+高、中剂量组比较差异有统计学意义 (P0.05)。结论：1.iAs3+和 iAs5+均可使大鼠肝脏组织中 SAM 的含量升高，通过 SAM 提供充足的甲基供体，增强机体的甲基化代谢能力。2.iAs3+或 iAs5+可影响 ARR 的活 力，还原酶的活性将直接影响甲基化的进程。3.iAs3+或 iAs5+染毒大鼠可改变 MTR 的活力，通过影响叶酸的正常代谢、细胞内 DNA 甲基化反应以及脱氧核苷酸三磷酸 盐的生物合成，进而影响砷的作用机制。4.长期摄入过量 iAs3+或 iAs5+可降低丙酮酸 激酶的活力，通过糖酵解作用改变砷甲基化的程度。5.长期慢性染砷（iAs3+或 iAs5+） 可使 As3MT 的 mRNA 表达升高，并存在剂量关系，影响砷的甲基化程度；iAs3+或 iAs5+可在大鼠肝脏中抑制 DNMTs 基因的 mRNA 的表达，表明不同价态的砷可通过 DNMTs 抑制 mRNA 的表达水平，影响表观遗传调控，从而诱导毒性作用的发生。 关键词：亚砷酸钠；砷酸氢钠；生化指标 The effects on arsenic metabolism and methylation biochemical indicator in rats treated with sodium arsenite and sodium arsenate Postgraduate: Shi Zhe Supervisor: Professor Zheng Yu-jian Associate Professor Wu Jun Abstract Objective