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提高草莓种子离体培养发芽率研究
提高草莓种子离体培养发芽率研究
摘要:该文EMC、‘哈尼’‘丰香’‘北辉’等10份草莓为试材。研究了培养基质和种子处理对发芽的影响,以提高草莓种子的发芽率。结果表明:草莓种手处理、培养基质、品种等对发芽率、发芽速度有很大影响。种子整粒培养,栽培品种发芽困难,而野生品种发芽较容易。种子切开处理的,在不同的培养基质上,供试备品种的种子发芽率超过60%,最高达100%。培养基质以1/2MS+3%蔗糖+0.6%琼脂的为好,发芽率达90%以上。
关键词:草莓;离体培养;再生植株;种子发芽率
草莓(F.xananassa Duch.)是双子叶植物纲蔷薇科草莓属多年生草本植物。是世界许多国家广泛栽培的一种浆果类植物,其适应性强,栽培品种和类型繁多。草莓的所谓种子,从植物学角度来讲,实际上是草莓的果实。按果实分属单果瘦果,按果实的开闭分类属闭果类,按种子胚乳分类属双子叶有胚乳种子。草莓果实是由许多小瘦果聚生在肉质的花托上而形成的聚合瘦果。草莓果实小,果实成熟后果皮不裂开。果皮较厚,吸水透气性差。种子内部还可能存在含有较高的导致休眠的抑制物质,直接培养发芽率较低,出苗慢且不整齐,成苗率低,有必要采取措施,提高草莓种子离体培养的发芽率。
1 材料与方法
1.1 试验材料、消毒与接种培养
用于种子离体培养发芽试验的草莓品种有EMC、‘哈尼’(Honeoye)、‘丰香’(Toyonoka)、‘枥乙女’(To-chiotome)、‘北辉’(Kitanokagayaki)、‘幸香’(Sachino―ka)、‘森嘎拉’(Senga Sengana)、‘全明星’(Allstar)、‘新明星’(Xinmingxing),其中EMC为二倍体野生森林草莓(Fragaria vesca L.)中选出的病毒指示植物,其他为八倍体凤梨草莓(F.xananassa Duch.)的栽培品种。
试材均取自沈阳农业大学草莓试验园,露地种植,田间正常管理,自然授粉,草莓果实成熟后剥取种子,室内阴干后,在无菌条件下将洗净晾干的草莓种子在70%酒精中浸泡10s,用无菌水冲洗1次,用无菌滤纸吸干,转入0.1%的HgCl2。溶液中消毒10min,用无菌水冲洗3次,每次10min。在无菌条件下将种子接种到无菌的培养皿或三角瓶中,置于室温25℃、光强4500lx、光照16h、黑暗8h的条件下培养。
1.2 试验内容
1.2.1 种子切开试验 切开处理是将消毒处理后的种子用锋利的手术刀切破部分种皮(不伤及胚及胚周围组织),然后接种于培养基上;以不切破种皮的为对照,即将消毒处理后的种子直接播于培养基质上培养。
1.2.2 培养基质试验 设4个处理:(1)无菌水培养在φ9cm培养皿内铺4张滤纸,用报纸包好后在121℃下灭菌40min。接种前培养皿中倒入无菌水使滤纸湿透,然后将消毒后的种子放入,最后用封口膜封上。每品种整粒和切开各接2个培养皿,每个培养皿接种20粒种子,分散均匀。(2)蒸馏水培养 在φ9cm培养皿内铺4张滤纸,加入蒸馏水使滤纸湿透,然后将未经消毒的种子接在培养皿中。每品种整粒和切开各接2个培养皿,每个培养皿接种20粒种子,分散均匀。(3)无激素固体培养基培养 培养基为1/2MS加3%蔗糖。用0.6%琼脂固化,每个100mL三角瓶装有40mL培养基。将消毒后的种子切开和整粒接种到培养基上。每瓶接种10粒种子,分散均匀,4次重复。(4)有激素的固体培养基培养培养基为1/2MS,加6-BA0.2mg/L+GA0.1 mg/L+IBA 0.01 mg/L+3%蔗糖,用0.6%琼脂固化。接种数量与重复同处理(3)。
1.3 调查项目与统计分析
于接种后的第2-第7天、第10、第15、第25天调查发芽的种子数,计算发芽率和发芽速度。
各处理种子发芽率的比较以观察的时间内的最大发芽率作比较:发芽速度的比较以发芽率达最大的天数作比较,达最大发芽率的天数越少,说明种子发芽越快,发芽势越高。
2 结果与分析
2.1 种子切开处理对草莓种子发芽的影响
由表1可见,栽培品种草莓的种子切开的,不论在什么基质上,也不论什么品种,其发芽率为63.33%~100%。而种子不切开整粒培养的,只以蒸馏水为培养基质的,某些草莓品种的种子有较低的发芽率,为13.33%--40.00%;以其他培养基质培养的无一发芽。野生草莓EMC整粒培养有较高的发芽率,不管以什么培养基质,发芽率为50v00%~96.67%。说明野生草莓种子有很强的生命力。
2.2 不同培养基对草莓种子发芽率的影响
由表2可见,以不同培养基质培养,各栽培品种草莓种子的发芽率,种子
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