【生物科学】分子细胞学技术.pdf

第 二 篇 分子细胞学技术 1 本篇所要叙述的内容为应用分子生物学原理研究细胞的技术。分子生物学技术是一 种日臻完善、研究生命科学的技术，它包括：基因重组、基因工程和遗传工程。其因重 组也即DNA 重组（DNA Recombination ），它指的是在体外用酶消化法，人为地把DNA 切割后再重新连接组合，组成杂交的 DNA 分子的技术。而基因工程（Gene Engeneering ）则包括DNA 重组技术，或者说是利用重组技术把重组的DNA 片段，整 合入载体（质粒或病毒等）中，形成遗传物质新的组合、人工改变和组建新基因的技术。 遗传工程（Genetic Engeering ）则为更大的概念，是利用前两种技术人工改变物种（包 括动物和植物）遗传性状的技术。 基因重组或DNA 重组技术 分子生物技术 — 基因工程技术 遗传工程技术 当然这仅是作者在个人理解基础上的一个粗略概括，非严格的定义，旨在说明它们 的层次关系。但从另一角度说，根据生物体不同。也即研究对象的不同，有用于复杂机 体如人、动物以及植物体的分子技术，也有以细胞、细菌和病毒等为对象的技术。本篇 所叙述的分子细胞学内容，主要是以研究人体体外培养细胞为主要对象的分子生物学基 本技术。它和本书第一篇内容有呈上启下的关系，故命名为分子细胞学技术。因其所涉 及的内容和范围是有限的，故在内容上并非面面俱到。但本书中所述分子技术内容，与 用于其它领域中的分子生物学技术，在技术原理上仍然是相同的，仅内容上大同小异。 因此在掌握本书所述内容基础上，对用于其它领域的分子生物学技术也不难掌握，故本 书所述内容虽有其特殊性也仍有着其普遍意义。 另外本书中的分子细胞学技术部分，在内容编排上与其它类似书有一些不同。虽然 以介绍技术为主的书，但采用了以研究对象和技术需要为纲的结构体系，我们认为这样 编排，读者更易理解。 80 年代末，分子生物学已进入生物学各个领域，不仅用于生命科学理论的探索， 也已成了细胞学和医学研究技术。鉴于当前这一科学的发展方兴未艾、技术革新层出不 穷、内容极其丰富和广泛，有关分子生物学的更广泛内容，请读者参阅其它技术资料。 2 第 十 三 章 分子细胞学基本理论知识 第一节 分子细胞学技术基本理论知识 从细胞生物学可知，真核细胞的出现，是生命发展质的飞跃。生命特征在于生命的 延续性；细胞自我复制（细胞分裂）和细胞分化是生命延续的保证。细胞结构和生物性 状代代相传即遗传性，遗传的变异和新性状的出现是生命的进化。生物遗传性曾长期被 认为是神秘和不可测知的生命现象。孟德尔 1865 年发现了遗传因子（基因），虽然赋予 遗传性以物质实体性的概念，但却长久未能获得令人信服和可以感知的证据。直到 20 世纪50 年代，Crick 和Watson 阐明DNA 双螺旋结构和它的半保留复制机制后，遗传的 秘密才大白于天下，从而DNA 也就成了人们研究遗传性和基因确切无误的对象，进而 导致分子生物学技术的形成，并以一泄千里之势，不断向前发展。 当前分子细胞学内容已极其丰富和复杂，难以尽述，也非本书目的，本节仅就与后 述技术相关问题作扼要回顾，更深入的内容，请读者参阅其它资料。 一、细胞和基因 （一）细胞的基本生命活动 细胞自我复制和细胞分化是细胞生存中的主要生命活动。细胞分化是细胞结构和功 能的特化；是在细胞生存过程中不断进化和发展的产物。细胞的分化能使细胞更好的适 应环境和保证生命延续。因此细胞自我复制和细胞分化是细胞生命活动中息息相关的两 个主要方面。没有细胞自我复制，便没有细胞生命的延续；没有分化，细胞则不能更好 地适应环境。细胞生命活动具有保守性，即遗传性。生物遗传性保证了物种的稳定性； 遗传性的改变是为变异，变异赋予了生命进化的可能性。 3 任何结构复杂程度不同的机体，都有着不同层次的生命活动。人体最复杂，它有着 整体、系统、器官、组织、细胞和分子等六个结构层