广西地方标准《穿山甲甲片高效液相色谱指纹图谱》（征求意见稿）编制说明.doc

《穿山甲甲片高效液相色谱指纹图谱》 编 制 说 明 （征求意见稿） 广西壮族自治区药用植物园 二○一一年 1.任务来源 本标准是广西壮族自治区质量技术监督局下达的2007年第三批广西地方标准制定（修订）计划项目（桂质监函[2007]365号文），由广西壮族自治区卫生厅提出、广西中药材标准化技术委员会归口、广西壮族自治区药用植物园负责起草。本标准研制承蒙科技部“十一五”科技支撑计划项目“蛤蚧优良品种选育研究”（2006BAI06 A12-03)课题资助。 2.标准制定意义 全球共有7种穿山甲[1-3]，其中中国穿山甲(Manis pentadactyla)系鲮鲤科动物穿山甲(Manis pentadactyla L.)的鳞甲(又称甲珠)，为常用中药，始载于《名医别录》，历版《中国药典》均有收载，由于乱捕滥猎和栖息地的破坏，早已成为受关注的物种,1975年起被列入CITES附录Ⅱ(WWW.)，1996年起在IUCN受胁物种红色名录里被列为近危(LR／nt)级别(WWW.)，现为我国二级保护动物，在我国主要分布在长江以南各省(江苏、安徽、浙江、江西、福建、河南、湖北、湖南、广东、广西、海南、云南、贵州、西藏、重庆、四川、香港、台湾)，有3个亚种[4], 即指名亚种(M.p.pentadactyla,产于台湾)、华南亚种(M.P.aurita，产于大陆华南地区)和海南亚种(M．P．pusilla，产于海南岛)。穿山甲(鳞)片是一种名贵中药材，具有通经下乳，消肿排脓，搜风通络等功效[5]，目前价格昂贵。本标准建立穿山甲甲片药材高效液相色谱指纹图谱,对药材进行质量评价，从指纹图谱来追根溯源寻找工艺操作中的问题和实现对原药材的质量控制 3．编制过程 3.1药材来源 2010版《中国药典》规定本品为呈扇面形、三角形、菱形或盾形的扁平片状或半折合状，中间较厚，边缘较薄，大小不一，长宽各为0.7～5cm.外表面黑褐色或黄褐色，有光泽，宽端有数十条排列整齐的纵纹及数条横线纹；窄端光滑。内表面色较浅，中部有一条明显突起的弓形横向棱线，其下方有数条与棱线相平行的细纹。角质，半透明，坚韧而有弹性，不易折断。气微腥，味淡。本标准所用样品均购自南宁市多家大药房。 3.2 色谱条件确定 经实验摸索，确定以下色谱条件： 色谱柱：Phenoxmenex Synergi Hydro-RP80A柱(25O mm×4．6 mm，4.0 μm)加C18。 流动相为乙腈—水按不同比例的流动相进行梯度洗脱。 测波长：230 nm。 流速：1.0 mL／min。 柱温：25 ℃。 进样量：20 μL。 3.3 供试品溶液制备 取穿山甲甲片，60 ℃置烘箱内烘干，粉碎，称取粉末约1 g，过60目筛，精密称定，准确加入15 mL 95％乙醇，超声提取3O min，过滤，滤渣再加入15 mL95％乙醇，超声提取30 min，过滤，合并两次提取液，将提取液减压浓缩，用甲醇定容至1O mL，摇匀，并用O．45 μm的一次性针筒过滤器过滤后置于4 ℃ 3.4 方法学考察 3.4.1稳定性考察 取穿山甲甲片的乙醇溶液测试品分别在0 h，6 h，12 h，24 h，36 h，48 h不同时间进行测试，考察色谱峰保留时间与吸收强度的一致性，各指纹峰的保留时间与吸收强度的RSD均小于1.2％。 3.4.2仪器精密度 实验在空调的设定温度为25 ℃时，取测试品连续5次进样，各指纹峰的保留时间、峰高及峰面积的RSD均小于0.6％。 3.4.3重现性实验 取穿山甲甲片分4次制作供试品，分别进样。结果显示各指纹峰的保留时间、峰高及峰面积的RSD均小于2.O％。 穿山甲甲片高效液相色谱指纹图谱图 （资料性附录）附录A 4 主要技术内容的确定 经过标准制订过程中的实验研究，本标准规定了穿山甲高效液相色谱指纹图谱的仪器与试剂、色谱条件、供试品溶液制备、方法学考察、指纹图谱。 5 与现行法律、法规和强制性标准的关系 本标准（征求意见稿）制定是遵循《中华人民共和国标准化法》等国家相关的法规和强制性标准，结合地方实际情况制定出来的，因此与现行法律、法规及强制性标准无冲突。 6 实施标准的要求和措施建议 将《穿山甲甲片高效液相色谱指纹图谱》作为推荐性标准试行一年后，对不完善的地方加以完善和修正，为进一步规范市场，建议该标准为强制性地方标准。 7 关于修改标准题目的说明 原标准题目是《穿山甲指纹图谱》，因在标准编写过程中发现，所涉及的内容只限于“穿山甲甲片高效液相色谱指纹图谱”，经制标小组充分讨论并听取相关专家的意见，现将题目改为《穿山甲甲片高效液相色谱指纹图谱》，特此说明。 参考文献： [1] Nowak R M．Walker’s mammals of the world[M]．Baltim