莱克多巴胺纳米磁快速检测方法--试纸法 征求意见稿.doc

ICS FORMTEXT FORMTEXT FORMTEXT FORMTEXT SN 中华人民共和国 FORMTEXT 出入境检验检疫行业标准 FORMTEXT SN/T FORMTEXT XXXXX— FORMTEXT 2011 FORMTEXT FORMTEXT 莱克多巴胺纳米磁快速检测方法 --试纸法 FORMTEXT Rapid screen of ractopamine residues in animal? original foods-- nano magnetic particles immunechromatographic assay FORMTEXT FORMDROPDOWN FORMTEXT FORMTEXT 2011 - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT 2011 - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发布 SN/T XXXXX—XXXX PAGE \* MERGEFORMAT 4 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 请注意本标准的某些内容有可能涉及专利。本标准的发布机构不应承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、清华大学深圳研究生院、深圳市外来有害生物质检测技术研发重点实验室。 本标准主要起草人：卢体康、秦智锋、林庆燕、马岚、孙洁、吕建强、杨俊兴、袁航、刘建利、廖立珊、陈兵、张彩虹、陶虹、花群义、陈书琨、曾少灵、曹琛福、吴峰、阮周曦、宗卉。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 莱克多巴胺纳米磁快速检测方法--试纸法 范围 本标准规定了采用纳米磁免疫层析法，对动物源性食品、饲料和尿液中的莱克多巴胺残留进行快速筛选检测。 本标准适用于动物源性食品、饲料和尿液等样品中莱克多巴胺残留快速筛选定性检测。 本标准检测下限为0.1μg/kg。 引用标准 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料采样标准 GB/T 18088 出入境动物检疫采样 SN/T 2123 出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范 原理 本方法是免疫层析法中的竞争抑制法，其主要原理是：通过将牛血清白蛋白偶联莱克多巴胺抗原、抗鼠IgG抗体、纳米超顺磁标记的抗莱克多巴胺抗体和其他试剂固着在硝酸纤维素膜、玻璃纤维素膜等纸膜材上制成检测试纸，应用层析式竞争法原理检测样品中的莱克多巴胺残留。样品中的莱克多巴胺在流动的过程中与玻璃纤维素膜上纳米磁珠标记的特异性抗莱克多巴胺杭体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素膜检测线上牛血清白蛋白?莱克多巴胺抗原偶联物的结合，使检测线上结合的纳米磁珠的量减少，使用磁性试纸判读仪测定检测线得到的磁强数值与样品中的莱克多巴胺含量成反比。若样本中莱克多巴胺浓度≥0.1μg/kg，磁性试纸判读仪判定为阳性结果，低于0.1μg/kg则判定为阴性结果。 试剂与仪器 试剂 4.1.1 除另有规定，本方法试验用水应符合GB/T 6682规定的二级水，所用化学试剂均为分析纯。 4.1.2莱克多巴胺纳米磁免疫层析快速检测试纸(见附录B.1)。 4.1.3冲洗液(配方见附录A.1。 4.1.4甲醇 4.1.5乙酸乙酯 4.1.6 氨水 4.1.7氨化甲醇溶液(配方见附录A.2)。 4.1.8 pH7.4 0.02M PBS溶液(配方见附录A.3)。 4.1.9 0.5μg/L莱克多巴胺阳性标准品溶液(配方见附录A.4)。 4.1.10莱克多巴胺阴性猪尿样：不含有莱克多巴胺残留且经气相-液相-液相(LC/MS/MS)仪器确证为阴性的猪尿样品。 4.1.11 空白对照：冲洗液。 仪器 4.2.1磁性试纸判读仪(见附录B.2)。 4.2.2离心机。 4.2.3涡旋式混合器。 4.2.4匀浆器。 4.2.5微量移液器：50μL、100μL和1mL单通道移液器。 样品采集、保存与运输 样品的采集 样品的采集、保存及运输应符合GB/T 14699.1、GB/T 18088和SN/T 2123的相关采样要求。 样品的保存 待检样品在2℃～8℃保存不应超过24h；-20℃保存不超过三个月； 样品的运输 样品应置于低温、密封的容器内运输。 样品制备 肌肉、肝脏制样 称取瘦肉或肝脏2.0g，于匀浆器中充分匀浆，