联合检测蛋白ERCC1Rad51和P53表达与预测晚期非小细胞肺癌铂类药物化疗疗效相关性研究.docVIP

联合检测蛋白ERCC1Rad51和P53表达与预测晚期非小细胞肺癌铂类药物化疗疗效相关性研究 　　[摘要] 目的 检测ERCC1、Rad5 1和P53在晚期非小细胞肺癌中的表达，探讨其临床意义和与铂类药物化疗疗效的相关性。 方法 选取我院2012年6月～2013年6月诊断为晚期非小细胞肺癌的68例患者病理学标本，采用免疫荧光组织化学染色法检测晚期非小细胞肺癌患者标本和外周淋巴血细胞中ERCC1、Rad51和P53的表达，观察ERCC1、Rad51和P53在晚期非小细胞肺癌患者标本和外周淋巴血细胞中表达的相关性；给予患者2～4个疗程铂类为基础的标准化疗方案，评价ERCC1、Rad51和P53蛋白的表达与化疗疗效相关性。 结果 晚期非小细胞肺癌患者标本和外周淋巴血细胞中ERCC1、Rad51和P53阳性率（分别为42.6%、35.3%和45.6%）和阴性表达率（分别为33.8%、27.9%和38.2%）相同，呈显著正相关（均P0.05）；ERCC1、Rad51和P53蛋白表达在患者年龄、性别、TNM分期、病理类型间无统计???意义（P0.05）；ERCC1阳性表达患者铂类药物化疗后总有效率为41.2%，显著低于阴性患者化疗后总有效率73.9%（P0.05）；Rad51阳性表达患者化疗后总有效率33.3%显著低于阴性表达患者化疗后总有效率63.2%（P0.05）；P53阳性表达患者铂类药物化疗后总有效率为29.0%，显著低于阴性患者化疗后总有效率53.8%（P0.05）。 结论 检测晚期非小细胞肺癌患者外周淋巴血细胞中ERCC1、Rad51和P53表达可很好反映其在癌组织中的表达情况；ERCC1、Rad51和P53表达较低的患者铂类药物治疗有效率更好，ERCC1、Rad51和P53对化疗疗效的预测为负相关。 　　[关键词] 晚期非小细胞肺癌；ERCC1；Rad51；P53；铂类药物；有效率；相关性 　　[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）23-30-05 　　非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）占所有肺癌的80%以上，NSCLC大约占了所有肺癌病例的85%，每年大约有超过180万例新增肺癌病例（所有肿瘤中占13%）和160万例肺癌相关死亡病例（所有肿瘤中占19.4%）[1]。仅有三分之一的NSCLC患者存在手术治疗的机会，约70%的患者在就诊时已属局部晚期（Ⅲ期、Ⅳ期）或是出现远处转移，5年生存率仅为15%[2]。几十年来大量临床研究证实以铂为基础的化疗是NSCLC唯一的全身治疗方案，以铂类为基础的化疗方案已成为NSCLC的标准化化疗方案[3]，临床上患者对这类药物存在较大个体差异，化疗结果存在较大差异，通过损伤DNA杀死癌细胞的化疗过程同样会削弱疗效，而DNA修复能力在肿瘤的发生、发展及治疗耐受中其重要作用，因此化疗前检测相关耐药基因或基因表达产物可使化疗药物应用更加个体化[4]。ERCC1（核苷酸切除修复交叉互补组1）是顺铂诱导DNA损伤修复中的关键酶，其高表达与铂类制剂的耐药性有关[5]。Rad51表达水平升高可使肿瘤细胞对放疗和化疗药物产生耐受作用[6]。P53基因是人类肿瘤中突变频率最高的抑癌基因，在DNA致损伤物诱发的凋亡过程中起重要作用[7]。本研究通过免疫荧光组织化学染色检测ERCC1、Rad51和P53在晚期非小细胞肺癌中和外周淋巴血细胞的表达，观察观察ERCC1、Rad51和P53在晚期非小细胞肺癌患者标本和外周淋巴血细胞中表达的相关性，和其与铂类药物化疗疗效的相关性。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选取我院2012年～2013年诊断为晚期非小细胞肺癌的68例患者病理学标本，所有患者均经过病理学检查后确诊为晚期NSCLC患者，未经过化疗治疗。TNM分期采用国际抗癌联盟（UICC）2009年修订的分期标准[8]。68例患者中男41例，女27例，年龄32～78岁，平均（57.0±9.3岁），晚期NSCLC患者为Ⅲ期、Ⅳ期患者，Ⅲ期50例，Ⅳ期18例。病理类型分别为23例鳞癌，20例腺癌，15例肺泡细胞癌和10例腺鳞癌。排除肝、肾功能不全患者，化疗前功能状态KPS60分以上。 　　1.2 标本处理 　　晚期NSCLC标本：采用免疫荧光组织化学染色方法，取患者新鲜癌组织以石蜡包埋，脱蜡水化后加H2O2（浓度3%）除去内源性过氧化物，微波抗原修复10min，滴加正常血清封闭液，室温温育30min，滴加一抗（1∶100倍稀释），37度1h，滴加生物素化二抗，37度10min，滴加试剂SABC，37度10min，DAB显色10min，苏木素复染，盐酸酒精分化，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树