采用植物组织培养消毒技术分离河口地区香蕉内生真菌初步研究.docVIP

采用植物组织培养消毒技术分离河口地区香蕉内生真菌初步研究 　　摘 要 对河口地区主栽的不同品种香蕉分3条线路进行样本采集，对采集到的香蕉组织进行内生真菌分离、鉴定，共分离到9属494株内生真菌。鉴定结果表明，刺盘孢属（Colletotrichun sp.）、曲霉属（Aspergillus sp.）、青霉属（Penicillin sp.）为优势菌群。这3种优势菌群在东部路线、中部路线、西部路线的分离频率分别为78.37%、79.55%、76.54%；在巴西蕉，威廉斯，红研一号、红研二号中的分离频率分别为84.19%、77.32%、79.60%、71.48%。表明香蕉植株组织内内生真菌具有多样性，为进一步研究提供基础数据。 　　关键词 河口 ；香蕉 ；内生真菌 ；物种多样性 　　分类号 S668.1 文献标识码 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2018.01.015 　　Abstract The sample collection of different varieties of Banana was carried out from 3 lines， the endophytic fungi from the tissue specimens was isolated and identified. About 494 strains of endophytic fungi were obtained， they could be classified into 9 genera. Colletotrichun， Aspergillus and Penicillin were dominant fungi. The isolation frequency of these three dominat fungi in the eastern direction， central direction and western direction were 78.73%， 79.55% and 76.54%， respectively. The isolation frequency were 84.19%， 77.32%， 79.60% and 71.48% in varieties of BaXijiao， Weilians， Hongyan 1 and Hongyan 2. It was concluded that the endophytic fungi species of Banana plants in Hekou area had great diversity，which could provide references for the further research. 　　Key words Hekou ； banana plants ； endophyticfungi ； species diversity 　　内生真菌是一类生活在健康植物组织内，不引起明显病害症状的微生物。国内外有关香蕉内生真菌的研究很少。2003年曹理想[1]采用分离法对华南地区健康香蕉根、叶内生真菌及放线菌进行了研究，杨佩文等[2]对云南不同地区香蕉根际内生真菌进行了分离，得到了93株内生真菌，并对次生代谢产物进行了抑菌圈活性测定实验。2012年王宇光[3]对海南省香蕉内生细菌进行了分离，得到了一株编号为KKWB-10的内生菌，该菌对镰刀菌四号小种具有一定的抗性。然而，河口地区香蕉植株组织内生真菌的研究尚属空白。多年香蕉病害研究发现，同一地区不同品种或同一品种不同地区香蕉抗病性都不一致，推测可能是由于内生真菌的专一性和多样性起关键作用。本文通过对河口县不同地区、不同品种香蕉植株内生真菌进行分离、鉴定，探讨寄生在香蕉植株组织内的内生真菌是否具有寄主专一性及物种多样性。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　按照河口“V”字型地形及海拔走势，结合香蕉种植区的分布，主要选择巴西蕉、威廉斯、红研一号、红研二号4个香蕉品种，东部、中部、西部3条大面积种植香蕉的路线为研究对象（东部路线选择南溪镇马多依到龙堡村委会；中部路线选择蚂蝗堡农场到南溪14队；西部路线选择坝洒农场6队到坝洒农场7队香蕉种植基地[4]。为了保证所取样本能够更全面代表河口地区，除以上3条主线外，其他地区也会随机采集相关材料），进行分离鉴定。 　　分离用培养基为PDA培养基和查氏培养基。 　　PDA培养基（1 000 mL）：马铃薯200 g，葡萄糖 20 g，琼脂20 g，蒸馏水1 000 mL。 　　查氏培养基（1 000 mL）：硝酸钠2 g，磷酸氢二钾1 g，氯化钾0.5 g，硫酸镁0.5 g，硫酸亚铁 0.0