针刺与埋线干预对抑郁大鼠中枢单胺类神经递质影响.docVIP

针刺与埋线干预对抑郁大鼠中枢单胺类神经递质影响 　　文章编号：0255-2930(2007)06-0435-03 　　中图分类号：R246.6　文献标识码：A 　　[摘要]　目的：探讨针刺与埋线治疗抑郁症的疗效差异和作用机制。方法：将32只成年雌雄各半的SD大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组和埋线组，每组8只。后3组采用孤养和长期不可预见的中等强度刺激应激造成抑郁大鼠模型，同时针刺组和埋线组开始治疗，周期21天。采用高效液相色谱系统――电化学检测器检测大鼠脑内去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)的含量。结果：与正常组相比，模型大鼠下丘脑和海马的NE、5-HT和DA均有明显下降(P0.05，P0.01)。针刺与埋线均可使脑内的神经递质有不同程度的提高，埋线组在提高下丘脑的5.HT和DA以及海马的DA方面更具优势，但两组间比较差异无显著意义。结论：针刺与埋线对抑郁模型大鼠均有效，其作用机制具有相似性，均可通过调节中枢单胺类神经递质而发挥治疗作用。 　　[主题词] 埋线；抑郁症/针灸疗法；单胺氧化酶/代谢；神经递质类/代谢 　　 　　研究表明，抑郁症是脑内单胺类递质，如去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)等功能不足所致。NE和5-HT等神经递质的功能紊乱与多种抑郁症状有关，如NE减少可引起注意力和记忆力减退，社会活动减少，觉醒状态改变；5-HT减少可导致冲动控制能力减弱，性欲减退，食欲下降，易激惹。针灸介入抑郁症的治疗已有近20年历史，取得了明显的疗效，临床上治疗方法也越来越多。但是，对于不同方法对中枢单胺类递质的影响，尚缺少深入的研究。本实验旨在观察慢性应激抑郁模型大鼠中枢单胺类神经递质的变化，以及针刺和埋线两种不同方法干预对它们的影响，现将结果报告如下。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1　材料 　　(1)　实验动物 　　成年SD大鼠，体重220～290g，雌雄各半(由广州中医药大学动物中心提供，动物合格证号：2005A008，SPF级)。 　　(2)　试剂与仪器 试剂：NE、DA、5-HT为美国Sigma公司产品；乙腈购自德国Merk公司，其余试剂均为市售分析纯。仪器：DIONEX Summit高效液相色谱仪(美国DIONEX公司)，Chromeleon色谱工作站(美国DI-ONEX公司)，HPl049A电化学检测器(美国安捷伦公司)，RC5C低温高速离心机(美国杜邦公司)，PHS-2C精密酸度仪(上海理达仪器厂)。 　　 　　1.2　方法 　　(1)动物分组 　　首先用Open-field法进行行为学评分，选择得分相近的32只大鼠，适应性喂养7d后，随机分为正常组、模型组、针刺组和埋线组，每组8只。正常组每笼饲养4只，雌雄分开。 　　 　　(2)模型制备 　　按照文献方法进行抑郁症模型大鼠的复制。模型组、针刺组和埋线组每笼饲养1只，接受21天各种不同的应激刺激，包括断水24h；断食24h；夹尾1min；10℃冰水游泳5min；摇晃每秒1次，5min；昼夜颠倒；电击足底，电压50mV，每5 s刺激1次，间歇5s，共刺激10次。每天随机选择一种刺激，每种刺激平均使用3次，共21天。 　　 　　(3)治疗方法 　　在给予大鼠各种不可预知的应激刺激同时，除模型组外，各治疗组开始治疗。针刺组于每日应激刺激前1h进行治疗，根据《实验针灸学》大鼠穴位定位方法取穴，选取“百会”“心俞”“肝俞”。穴位常规消毒，选用华佗牌0.25mm×25mm针灸针进行针刺。“百会”向尾部斜刺，进针深度约为2mm，“心俞”“肝俞”(左右两侧穴位交替使用，每次取单侧)向尾部呈45°角斜刺5mm，每穴均匀捻转刺激30s，留针15min。每日1次，共21次。 　　埋线组于应激刺激前1h进行治疗，取穴同针刺组，穴位常规消毒，用改良简易注线法，取一次性医用7号注射针头作套管，直径0.30 mm、长50mm不锈钢毫针(剪去针尖)作针芯。将“0”号医用羊肠线剪成0.5cm线段若干，浸泡在75％的酒精内备用。将针芯退出少许，羊肠线放人针头内，垂直穴位快速进针后稍做提插，推动针芯将肠线留于穴内。第1天、第7天和第14天进行埋线，共3次。 　　 　　(4)取材方法 　　治疗21d后，将全部大鼠均快速断头,剥离全脑，于冰浴下迅速分离出海马和下丘脑，称重后置Eppendorf管中，保存于-70℃的冰箱中待测。 　　(5)测定方法 　　将各组海马、下丘脑分别置于玻璃匀浆器中，加入2％三氯乙酸溶液(预冷至4℃)500μL，温和匀浆，匀浆液用吸管小心转移入离心管中，用200μL磷酸二氢钠(Nail2P04)溶液[0.33tool/L，pH6，内含0.5mmol/L乙二胺四乙酸