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针刺对一次离心运动后大鼠炎症反麻影响
针刺对一次离心运动后大鼠炎症反麻影响
摘要:探究针刺干预对一次离心运动后大鼠炎症反应的影响。方法:114只雄性(SD)大鼠,随机分为4组:安静对照组(C)、单纯针刺组(A)、单纯运动组(E)、运动针刺组(EA),E组和EA组均在坡度-16°的跑台上进行一次离心运动,A组和EA组进行比目鱼肌部位斜刺,之后按0h、2 h、24 h、48 h、72 h、120 h等时相进行取材。HE染色观察比目鱼肌细胞形态结构;Western Blot法分别检测比目鱼肌、股直肌中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达;Elisa法检测血浆中TNF-α的含量。结果:1)HE染色发现c组和A组均无显著变化,E组出现不同程度的炎性细胞浸润,运动后进行针刺使炎性细胞浸润的峰值提前。2)比目鱼肌中TNF-α,A组与c组相比均无显著性差异(P0.05);E组与C组、EA组具有显著性差异(P0.05);E组与C组具有显著性差异(P0.05)。结论:单纯进行针刺干预不会引起骨骼肌和血浆中明显的炎症反应,离心运动可以导致骨骼肌出现一定程度的炎症反应,离心运动后进行针刺干预使针刺部位骨骼肌炎症反应的程度增加,并在峰值之后促使其消退;针刺产生的作用是局部效果,对非针刺部位骨骼肌和血浆的炎症反应不会产生显著影响。
关键词:离心运动;骨骼肌;血浆;炎症;针刺
中图分类号:G 804.2 文章编号:1009-783X(2017)01-0085-06 文献标志码:A
针刺在中国传统医学中具有重要地位,许多研究领域中已有较为广泛应用,不同学科也对其机理进行了大量探讨。研究证实,运动能引起骨骼肌细胞内钙离子(Ca2+)产生变化,进而诱发后续的一系列生理反应,而运动后对骨骼肌进行针刺干预可以使胞浆内Ca2+更快地恢复至正常水平,因此,针刺在运动领域也有较多应用。本实验室前期研究发现针刺具有促进骨骼肌机能恢复及治疗肌肉损伤等作用,之后从骨骼肌与运动方面进行了一系列的机理探索,其中有些研究发现针刺能够促进离心运动后大鼠骨骼肌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达。TNF-α具有较多的生物学功能,可以促进内皮细胞表达粘附分子,有促使白细胞游出,具有强烈的趋化和激活嗜中性粒细胞的作用,可以作为炎症反应的重要指标,这提示我们针刺干预对离心运动后大鼠炎症反应有一定影响。
20世纪70年代Tullson提出机体运动后会产生与急性免疫有关的反应,之后较多研究者认为大鼠进行一次性长时间离心运动,产生的炎症反应在早期阶段局部组织的主要浸润细胞为嗜中性粒细胞,后期炎症反应的主要细胞为巨噬细胞和淋巴细胞。运动导致的这些炎症反应和骨骼肌延迟性肌肉酸痛、骨骼肌微细损伤修复、骨骼肌凋亡自噬等均有重要关系,因此,探究针刺干预对运动后机体炎症反应的影响具有重要意义。
目前针刺对运动后骨骼肌的作用机制已有较多研究,但对于炎症反应的影响方面还尚未有很清楚的认识。本实验通过对离心运动后大鼠进行针刺干预,观察大鼠比目鱼肌细胞形态结构,分析比目鱼肌、股直肌、血浆中TNF-α的变化,结合本实验室以往的研究结果,探究针刺干预对一次离心运动后机体炎症反应的作用效果和部位,以期能够从炎症角度对针刺在运动方面的作用机理进行一定理论补充。
1材料与方法
1.1动物与分组
本实验选用8周龄雄性(SD)大鼠共114只,SPF级别,体重为(199±6.8)g,购于北京华阜康生物科技股份有限公司,许可证编号:SCXK(京)2009-0007。大鼠在中国医学科学院药用植物研究所动物房内进行饲养和相应训练。分笼饲养,每笼6只,按照国家标准啮齿类动物饲料进行喂养,自由进食、饮水,室内温度为(22±2)℃,相对湿度30%~60%,光照12 h+黑暗12 h模拟昼夜交替。大鼠适应性饲养3 d以后,进行相应后续实验。
实验大鼠进行随机分组,分为安静对照组(Control,C)、单纯针刺组(Acupuncture,A)、单纯运动组(Exercise,E)、运动针刺组(Exercise+Acupuncture,EA)4个组。其中,后3组按取材时间又分为O h、2 h、24 h、48 h、72 h、120 h等时相组,每组各6只。
1.2处理方法与取材
运动方案:本实验运动方案参照Armstrong的经典离心运动模型,所有参与运动的大鼠在正式实验之前进行为期3 d适应性跑台训练:第1天跑台坡度0°,跑速16 m/min,时间5min第2天跑台坡度0°,跑速16 m/min,时间10 min第3天进行休息。第4天开始正式实验,坡度-16°,跑速16 m/min,每次训练时间90 min。E组和EA组进行运动,C组和A组不予运动。
针刺方案:
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