银耳多糖抗溃疡作用试验研究.docVIP

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银耳多糖抗溃疡作用试验研究

银耳多糖抗溃疡作用试验研究   【摘 要】 目的 通过不同的试验方法和不同的溃疡模型观察银耳多糖抗溃疡作用的途径和机制。方法①采用两种给药方式研究银耳多糖对应激型溃疡的作用途径。②对消炎痛型溃疡的作用和其与前列腺素(PGE2)的关系。③对慢性醋酸型胃溃疡的影响。④对幽门结扎型胃溃疡的影响,同时检测胃液量、总酸、游离酸和胃蛋白酶活力。结果①银耳多糖主要通过局部作用抑制应激型溃疡的形成,末次给药1 h后做诱导溃疡试验,试验组溃疡划级为1.85±0.83,对照组为4.29±1.01,两组之间有非常显著差异(P<0.001),末次给药12 h后做诱导溃疡试验,试验组溃疡划级为3.32±0.97,对照组为4.23±0.81,两组之间无显著差异(P>0.05)。②对消炎痛型溃疡有抑制作用,与对照组比较两组之间有显著差异(P<0.05),对前列腺素无影响。③对慢性醋酸型溃疡有显著抑制作用,与对照组比较,两组之间有非常显著差异(P<0.01)。④对幽门结扎型溃疡有显著抑制作用,与对照组比较,两组之间有非常显著差异(P<0.001),银耳多糖的制酸效应和抑制胃蛋白酶活力,分别与对照组比较两组之间有非常显著差异(P<0.001)。结论银耳多糖对大鼠应激型溃疡,慢性醋酸型溃疡,幽门结扎型溃疡和消炎痛型溃疡均有抑制作用,以前三项作用强。其作用机制以制酸为主,并有保护胃黏膜和抑制胃蛋白酶活力的作用。   【关键词】银耳多糖;胃溃疡模型;前列腺素       溃疡病病因复杂,发病机制尚未完全清楚,本研究仅就目前已知主要因素,通过动物试验分析银耳多糖抗溃疡作用及机制。银耳多糖具有抗溃疡作用[1],是由于它是药食两用菌类的天然成分,无毒、安全、无副作用,可以长期服用,同时又有提高免疫力和促进机体蛋白质合成等功效[2],因而它是防病治病和维护健康的首选物质,值得进一步深入研究。      1材料与方法      1.1材料动物Wistar大鼠由山东省药检所提供,银耳多糖由中国海洋大学水产学院生化实验室提取[3-5]。   1.2方法本试验分5大组进行,每大组均取大鼠16只,雌雄各半,随机分2组,每组8只,亦雌雄各半,一为试验组,另一为对照组[6,7]。   1.2.1应激型溃疡试验Ⅰ试验组以500 mg?kg-1银耳多糖灌胃给药1次/d,连续14 d;对照组用3% CMC,第13天禁食,末次给药后12 h,将大鼠在浅麻醉下,捆绑于木板上,醒后浸于23℃水槽中,8 h后拉断颈椎处死动物,剖腹取胃,结扎幽门,从贲门注入1%甲醛10 ml,结扎贲门,30 min后沿胃大弯剪开胃,将胃平展于玻璃板上,检查胃壁溃疡,按张守仁法划级[8]。   1.2.2应激型溃疡试验Ⅱ 试验组以500 mg?kg-1银耳多糖灌胃给药,1次/d,连续3 d;对照组用3% CMC,第2 天开始禁食,第3天给药后1 h,用前法做应激型溃疡诱导试验。   1.2.3消炎痛型溃疡试验试验组以500 mg?kg-1银耳多糖灌胃给药,1次/d,连续3 d,第2天开始禁食,第3天给药后0.5 h给大鼠腹腔注射消炎痛40 mg?kg-1,5 h后拉断颈椎处死动物,按前法检测溃疡,同时取胃液测定前列腺素含量。   1.2.4慢性醋酸型溃疡试验全部受试动物禁食12 h,在乙醚麻醉下剖腹,暴露胃,用内径5 mm长5 cm玻璃管座放于胃体前部浆膜面,向管内注入100%醋酸0.1 ml,使醋酸与胃浆膜面接触1 min,然后吸去醋酸,生理盐水洗净关闭腹腔,术后动物随机分2组,雌雄各半,试验组以500 mg?kg-1银耳多糖灌胃给药,1次/d,连续14 d,对照组用3% CMC,第14天开始禁食,第15天拉断颈椎处死动物,取胃检查,用10倍显微镜测定溃疡面面积(mm2)。   1.2.5幽门结扎型溃疡试验试验组以500 mg?kg-1银耳多糖灌胃给药,1次/d,连续3 d,第2天起禁食,第3天给药后2 h,在乙醚麻醉下剖腹,暴露胃,结扎幽门,关闭腹腔,术后禁食禁水10 h后,拉断颈椎处死动物,剖腹暴露胃,夹住食道,取出胃,收集胃液计量,测总胃酸、游离酸和胃蛋白酶活力,同时将胃沿大弯剪开,检测溃疡和划级。    胃酸测定采用滴定法[7]。蛋白酶活力采用METT法[7]。前列腺素(PGE2)测定,胃液离心后取上清液0.5 ml加1.5 ml无水乙醇和2 ml 1 N KOH甲醇溶液,在室温下异构化30 min,于278 nm处测定OD以0.5 N KOH甲醇溶液作对照,PGE2含量以μg计算。      2结果      2.1应激型溃疡试验Ⅰ受试动物用药14 d,于末次给药后12 h诱导溃疡,其结果(表1)。      2.2应激型溃疡试验Ⅱ受试动物用药3 d,于末次给药后1

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