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铁皮石斛提取物抗氧化活性研究 　　摘要：比较了4种栽培模式下铁皮石斛提取物的抗氧化活性，为铁皮石斛的栽培进一步开发利用提供理论依据。用煎煮法回流提取了4种栽培模式铁皮石斛，浓缩冻干得到铁皮石斛提取物，以抗坏血酸（Vc）为对照，分别测定了提取物的清除DPPH自由基、羟基自由基（?OH）、超氧阴离子自由基（O-2）能力。结果表明：4种栽培模式下铁皮石斛提取物均具有不同程度的抗氧化活性，且抗氧化活性与提取物质量浓度呈量效关系。林下床栽铁皮石斛提取物的?OH清除活性（IC50值为4.329 mg/mL）在4种栽培模式中最好；林下附生铁皮石斛提取物的DPPH（IC50值为4.494 mg/mL）和O-2（IC50值为2.773 mg/mL）清除能力在4种栽培模式中均最强，且林下附生铁皮石斛提取物的O-2清除活性于对照抗坏血酸（Vc）的IC50值与无显著性差异。结论：铁皮石斛提取物可以抑制抗氧化活性，且林下仿野生栽培铁皮石斛的抗氧化活性优于大棚床栽。 　　关键词：铁皮石斛；提取物；抗氧化活性 　　中图分类号：R284 　　文献标识码：A 文章编号2016 　　1 引言 　　生物体内的活性氧自由基，在一般情况下处于平衡状态，但自由基处于辐射或化学物质诱导等情况下，会造成平衡状态的缺失。此时生物体的各种疾病就会出现[1～3]。目前抗氧化剂分为化学合成抗氧化剂和天然食品抗氧化剂，以天然食品为原材料的抗氧化剂因健康、无毒而成为当前抗氧化剂发展的主要趋势[4]。铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）是兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）植物，为我国传统名贵中药材，具有药用价值高，市场需求大等特点[5]。但野生铁皮石斛资源早在20世纪80年代已非常稀缺，被列为国家重点保护的濒危药用植物，因此当前铁皮石斛主要来源于人工栽培[6，7]。铁皮石斛人工栽培模式主要分为林下仿野生栽培、大棚设施栽培、盆栽等系列栽培模式[8，9]。同时，不同栽培模式铁皮石斛的生长环境存在一定的差异性[11]，但目前关于铁皮石斛栽培模式与抗氧化活性方面的比较尚未深入研究。因此本试验以4种栽培模式下铁皮石斛为材料制备提取物，研究林下附生、林下床栽、林下悬挂3种仿野生栽培模式与大棚栽培模式下的铁皮石斛提取物体外抗氧化活性的差异，以明确铁皮石斛抗氧化活性的最佳栽培模式，为铁皮石斛的进一步开发利用提供理论依据。 　　2 材料与方法 　　2.1 材料、试剂与仪器 　　2.1.1 材料 　　试验设在漳州扬基生物科技有限公司的龙眼果场与设施大棚内进行。选择同一来源，同一批次，同一品种的铁皮石斛组培苗，于温室内驯化1年，2013年7月选取长势一致、健康、无病虫害、饱满的铁皮石斛幼苗分别移植于龙眼树下和大棚内，栽培模式详见表1。于2015年3月采收样品，并去除叶片、根和叶鞘，鲜茎置-20 ℃冰箱备用。 　　2.1.2 试剂 　　二苯代苦味酰基自由基（DPPH）、邻苯三酚、邻二氮菲，硫酸亚铁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、H2O2等试剂均为均为国产分析纯。 　　2.1.3 仪器与设备 　　TU-1810 紫外可见光分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；AKWL-IV-50 艾柯超纯水系统（成都康氏康宁科技发展有限公司）；BS214D电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；台式离心机（美国 Kendro 仪器公司）；DK-S24型电热恒温水浴箱（上海景宏试验设备有限公司）；N1001 EYELA 旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）；奥立龙 Model868 型酸度计（北京长风仪器仪表公司）。 　　2.2 方法 　　2.2.1 提取物的制备 　　取铁皮石斛鲜茎，洗净后剪段并精密称量置于500 mL烧杯中，按1∶2（m/V）料液比加入蒸馏水浸泡1 h，加热回流2 h，同样的方法提取2次，合并提取液，离心（3500 r/min，10 min，2次），取上清液减压浓缩，随后真空冷干，置-20 ℃冰箱保存备用。 　　2.2.2 铁皮石斛抗氧化性的测定 　　将铁皮石斛提取物及Vc标准品（阳性对照）分别配制成浓度为2、4 mg/mL、6、8、10、12、14、16 mg/mL的样品液，用于抗氧化活性测定。 　　参照黄琴等[12]的方法测定铁皮石斛提取物对DPPH、?OH自由基清除活性，并计算IC50值（当清除率为50%时的样品浓度）；参照Sarikurkcu C等[13]的方法测定铁皮石斛提取物对O-2自由基清除活性，并计算IC50值（当清除率为50%时的样品浓度）。所有试验平行测定3次。 　　1.3 数据统计分析 　　数据采用Excel 2010整理、统计、做图；使