实验三蟾蜍坐骨1课件.ppt

厦门大学医学院 基础医学实验教学中心 机能学模块;Introduction;;1933年美国科学家 Gasser和 Erlanger用示波器对外周神经活动进行研究性总结，并发表了著名的论文《Electric signals of Nervous Activity》（1939年）;剑桥大学Hodgkin和Huxley应用金属微电极 对乌贼巨神经纤维电活动进行系统研究， Hodgkin和 Katz提出离子假说 1949年，凌宁和Gerard 发明玻璃微电极。电压钳和膜片钳将电生理研究推向分子水平;1.材料和方法 (Materials and methods );1.材料和方法 (Materials and methods );1. 3器材( Experimental apparatus) RM6240生物信号处理系统(RM6240 biolgical signal collecting system )（成都仪器厂）、神经标本盒（ nerve chamber )。;1.4制备坐骨神经干（ preparation of sciatic nerve trunk ） ;1.5 仪器连接和参数 (Apparatus junction and parameter) 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道。 仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率1KHz、灵敏度5mV，采样频率：100KHz，扫描速度：0.2ms/div。单刺激方式，刺激幅度1.0V，刺激波宽0.1ms，延迟2ms，同步触发 ;采样频率;1.6 记录动作电位( Record action potential) 神经干标本置于标本盒的电极上，神经与电极接触良好，调节刺激电压，记录动作电位;2.1 测定中枢端引导的双相动作电位 （biphasic action potential, BAP) 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波刺激神经干末梢端， 测定中枢端BAP正、负向振幅(amplitude，A)和 时程(duration，D） ??????;2.2 测定末梢端引导的双相动作电位 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端， 测定末梢端BAP正、负相振幅和时程???????;2.3?兴奋传导速度的测定? 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间差Δt ，根据υ＝ S R1- R2- / Δt 计算出AP的传导速度;2.4 引导电极间距离与动作电位振幅和时程的关系?? 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波刺激神经干中枢端，测定第1对 引导电极间距为10、20、30mm时的BAP正相振幅和时程? ?????;Am;Dm;2.6 观察刺激强度（U）与动作电位振幅的关系 刺激波宽0.1ms，刺激电压从0.1V开始， 按步长0.05V增加，刺激 电压每增加一次刺激神经干一次，并记录刺激电压和MAP振幅;2.7 测定KCl处理前后MAP振幅 刺激电压1.0V，刺激波宽0.1ms，记录3mol/LKCl 处理前，处 理后5′时MAP的振幅;2.8 测定 procaine 处理前后BAP振幅 刺激电压1.0V，刺激波宽0.1ms，记录4％procaine处理前， 处理后5′时BAP的振幅。;蟾蜍坐骨神经干电生理实验 ;;1. Materials and methods (材料和方法);;2. 观察项目（observations);;3.1 刺激波宽0.1ms时，阈刺激Uth为0.45±0.08V；最大刺激?Umax±s V，刺激电压1.0V时，动作电位的传导速度为 ?±s （m/s)见表1。;3.2 刺激电压1.0V，刺激波宽0.1ms时，中枢端引导的动作电位正相和负相振幅分别为?Ac1±s mV和?Ac2±s mV，?Ac1 大于?Ac2 ，两者有（或无）显著性差异（p0.05或p0.05)；动作电位正相时程?Dc1±s ms显著短于负相时程?Dc2±s ms，两者有（或无）显著性差异（p0.05或p0.05)，末梢端引导的动作电位正相振幅?Ap1±s mV大于负相振幅?Ap2±s mV， 两者有（或无）显著性差异（p0.05或p0.05)；动作电位正相时程?Dp1±s ms显著短于负相时程?Dp2±s ms，两者有（或无）显著性差异（p0.05或p0.05)，见表1和图1、图2;Ap1;3.3 刺激电压1.0V，刺激