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双缩脲法测定血清总蛋白 溴甲酚绿法测定血清清蛋白 （课本实验63，64） 临床生物化学教研室 目的： 1.掌握双缩脲法测定血清总蛋白的原理和操作。 2.掌握溴甲酚绿法测定血清清蛋白原理和操作。 3. 熟悉血清总蛋白和清蛋白测定的临床意义。 试剂 总蛋白试剂 总蛋白标准液浓度70g/L 白蛋白试剂 白蛋白标准液浓度46g/L 双缩脲法 临床测定总蛋白质的首选方法 原理： 碱性条件下，蛋白质的肽键与2价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物。 肽键 + Cu2+ → 紫红色络合物 (540 nm) 蓝绿色复合物 pH4.2 Brij-35 （A630nm） 清蛋白+BCG 溴甲酚绿法(BCG) 目前测定血清清蛋白最常用方法 原理： + — Calculation： 血清总蛋白（g/L）= Au As ⅹ蛋白标准液浓度（g/L） Announcements： (2) 黄疸，溶血等血清怎么办? 做标本空白管。 (3) 高脂血症混浊血清怎么办? 血清经丙酮或乙醚萃取后使用。 BCG法测定血清白蛋白操作步骤： 加入物 (ul) 空白管B 标准管S 测定管U 样本 - - 5 标准液 - 5 - 蒸馏水 5 - - 白蛋白试剂 1000 1000 1000 混匀， 置室温10min，各管加1ml蒸馏水，混匀，用波长628nm处，空白管调零，测定A。
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