实验一 鸡新城疫疫苗(一)课件.pptVIP

实验一 鸡新城疫油乳剂灭活苗的制备技术（一） ;目的和要求： ;实验内容： ; 活胚可看到清晰的血管和鸡胚的暗影，比较大一些的可以看见胚动，随后每日观察一次，将胚动呆滞或没有运动的、血管昏暗模糊者，即可能是已死或将死的鸡胚，要随时加以淘汰。生长良好的蛋胚一直孵育到接种前，具体胚龄视所拟培养的病毒种类和接种途径而定。;2.接种材料的制备 ：;3.照蛋定位 ：;4.病料接种： ;（1）尿囊腔接种 ;（2）绒毛尿囊膜接种 ; 在针尖挑破处滴一滴灭菌生理盐水或甘油，然后用吸头在气室小孔上吸气，使胚内造成负压，这时卵窗处绒毛尿囊膜下陷而形成人工气室，此时可见生理盐水或甘油迅速渗入。用注射器滴加2～3滴接种物于卵窗的绒毛尿囊膜上，以透明胶纸封住卵窗。气室小孔用石腊密封，接种后的鸡胚平放在孵化箱中，卵窗向上，不要转动。 ;（3）卵黄囊接种 ;6.接种后的孵化和观察 ;7.收毒 ;（2）根据接种部位，病毒种类或需要，收获相应的鸡胚材料如尿囊液、羊水、绒毛尿囊膜、胎儿、卵黄囊等，有时需要收获全胚（除去卵黄和蛋白），如新城疫病毒、马脑炎病毒等。;羊水：吸完尿囊液后，可用镊子夹住羊膜，将巴氏吸管直接插入羊膜腔吸取羊水，然后再用镊子提起羊膜或压住胎儿，直至羊水收获干净。相当一部分病毒其羊水和尿囊液可以混合，如新城疫，支气管炎、法氏囊病毒等。有些不能混合，则应将两者单收、单放。 ;胚胎：消毒、打开气室卵壳后，用镊子撕破卵壳膜和绒毛尿囊膜，夹起胚胎，用剪刀剪断卵黄带，将胎儿放灭菌容器内即可。 ;（3）接种点最好选在胚头左侧，因一般人均右手持注射器，注射时易往左侧倾斜，这样不易刺伤鸡胚。 （4）接种后注射口和气室孔均应用石蜡切实密封，防止细菌污染造成死亡。死亡鸡胚应随时取出，以免时间过长细菌繁殖并对周围鸡胚造成污染。 （5）鸡胚取出冷冻时应保持气室向上，否则收获尿囊液时很困难。