实验七八课件.ppt

实验七 单向琼脂扩散试验 实验八 双向琼脂扩散试验 指导老师：程燕;概 述;沉淀反应主要包括： 1、环状沉淀反应：主要是用已知的抗体诊断未知的抗原（试管内）。 2、絮状沉淀反应：常用于毒素与抗毒素的滴定（试管内或凹玻片上）。 3、琼脂凝胶免疫扩散：指抗原抗体在琼脂凝胶内扩散，特异性的抗原抗体相遇后，在凝胶内的电解质参与下发生沉淀，形成可见的沉淀线。这种反应简称琼脂扩散。（平皿或玻片上） ;实 验 原 理;实 验 原 理;实验七 单向琼脂扩散试验;（二）实验原理;沉淀环的大小与孔中抗原的浓度、琼脂中的抗体浓度相关。 抗体浓度高时，沉淀环小而边缘清晰；抗体浓度降低时，沉淀环增大，但边缘不清晰；抗体浓度太低时，沉淀环继续增大，边缘模糊，无法测定大小。 若选择适当浓度的抗体制成琼脂板，以得到边缘清晰的沉淀环为基准，并固定下来，则沉淀环的直径与抗原浓???在一定范围内，成直线关系。 用不同稀释度的标准抗原进行试验，并以沉淀环直径为横坐标，相应孔中抗原浓度为纵坐标，在半对数坐标纸上作图，画出标准曲线，则待测标本中的抗原含量即可从标准曲线上查出。 ;（三）实验材料;（四）实验步骤;（四）实验步骤;;（五）实验结果;实验八 双向琼脂扩散实验;（二）实验原理; 根据沉淀线的形态和位置等可作如下三种分析： 1. 抗原或抗体的存在与否及其相对含量的估计 2. 抗原或抗体相对分子量的分析 3. 用于抗原性质的分析;1. 抗原或抗体的存在与否及其相对含量的估计;2. 抗原或抗体相对分子量的分析 扩散速度受分子量的影响； 分子量小者扩散快，反之则较慢。由于慢者扩散圈小，局部浓度则较大，形成的沉淀线弯向分子量大的一方。如若两者分子量相等，则形成直线。; 两种受检抗原的性质可完全相同、部分相同或完全不同。;双向琼脂扩散平板法;（三）实验材料;（四）实验步骤;注意事项： 1、不要产生气泡，以加满为度。加少了，影响反应程度，加多了，易溢出，也影响反应结果。 ;;;（六）实验结果