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分子生物学在微生物检验中的应用 ;分子诊断学;分子诊断学三个阶段;荧光定量 PCR(real-time PCR)
通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标 记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对结果进行分析,计算待测样品的初始模板量。
荧光定量 PCR仪
光定量PCR仪是一种带有激发光源和荧光信号检测系统的PCR仪,通常配有电脑系统及相应的分析软件。;荧光定量PCR标记方法
内掺式染料
SYBR Green I
序列特异性探针
Taqman
Molecular Beacons
Dual Probes(FRET)
引物特异性探针
Amplifluor (Intergen)
;Oligo 1: Fluorescein;R;;R;;5’;荧光定量实时PCR与普通PCR的比较
实时在线监控
对样品扩增的整个过程进行实时监控,能够实时地观察到产物的增加,直观地看到反应的对数期
降低反应的非特异性
使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合,提高了PCR反应的特异性
增加定量的精确性
全程监控,准确的算法进行定量
结果分析更加快捷方便,无需跑胶
;基因和蛋白质芯片;基因微阵列技术优势;目前国内外蛋白质芯片或基因芯片产品的进展情况;;;建立基因芯片技术平台;等温扩增技术;未知病原体检测新技术;未知病原体检测-----高通量测序I;;;未知病原体检测新技术-Affymetrix基因芯片技术;再测序芯片技术用于分子诊断举例:;甲流变异;
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