实验动物第11章课件.ppt

第 十 一章 常用动物实验技术 ; 动物实验技术是实验动物科学的主要组成部分，是生命科学研究的主要手段之一。它包括动物实验的设计，实验动物的选择、应用；实验设备的应用；试剂、样品的筛选、配制、应用；实验后实验动物的饲养、观察、实验样品的采集、处理等多方面的知识。在生命科学研究的各个学科都有其不同的应用，实验方法也是多种多样的。但一些基本技术是许多学科的实验都要应用的，我们称为常用动物实验技术，是动物实验工作者必须掌握的基本功。 ;一、动物实验前应注意的问题 动物实验前要做好充分的准备，选择好合格的实验场所，实验后动物的饲养场所等。动物实验人员要取得动物实验人员岗位证书，熟练掌握动物实验技术。 1、要在动物实验前一周领取动物，在实验饲养环境内饲养观察一周，以使动物适应饲养环境。 2、每天测量动物体温，并记录室内温、湿度等。 3、实验前不要使动物感到异常。 4、注意消毒，不要使动物离开等级饲养设施，尤其是使用独立送风笼具或层流柜进行动物实验饲养时要严格按操作规程进行。 5、实验中要做好记录，包括实验起始时间，环境条件等。 ;二、动物的购入 领取或购入实验动物前要注意以下几个问题： 1、领取动物前要按计划检查各项准备工具，如笼具数量、饮水瓶、饲养环境卫生、消毒、饲料等。 2、购入动物时要索取所购动物的质量合格证，包括合格证批号，动物的品种、品系、年龄、体重等，并有签发人签字盖章。 3、同时购入相应的饲料和垫料。 4、运输时要注意防止途中污染和动物窒息死亡，注意保持温度、湿度。长期运输还要给予足够的饮水和饲料。 5、运输动物要用相应等级的笼器具，例如运输清洁级动物要用带有空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽的笼盒，并严格检查密封状况。 ;三 实验动物的抓拿、保定、编号、分组和除毛 （一）抓取和固定 在动物实验中必须首先抓取并固定动物，正确地抓取固定动物是为了不损害动物健康，不影响观察指标，防止被动物咬伤，保证实验的顺利进行。同种动物往往有几种不同的固定方法，有些单???还有自己的习惯的方法。但不管用什么方法，实验者必须了解动物的一般习性。操作小心仔细，大胆敏捷，熟练准确，切不可粗暴，恐吓动物。本节介绍一些常用的方法。 ;2、? 大鼠的抓取固定： ? ? ; 也可用无纺布巾或无纺布三角袋包起大鼠进行固定。 ? ;3、? 豚鼠的抓取固定： ; 4、家兔的抓取固定 ? ; 兔的固定方法常用的有手法固定、盒式固定和台式固定法。手法固定常用于灌胃给药，人坐在椅子上用一只手抓住颈背部毛皮，另一只手抓住两后肢放入大腿之间用双腿夹住兔下半身，空着手抓住两前肢固定之，抓颈背的手同时捏住两个耳朵，不让头部转动。 盒式固定用于耳部采血和耳部血管注射，把兔放入盒或筒内，前方露出头部。 ;。 ;台式固定适用于测血压、呼吸等实验或进行手术操作 （图10）。 ;让麻醉兔仰卧，用线绳依次将四肢系扎在固定器两侧，把头部放在金属制的首枷和嘴环上固定。如果做头部手术，可用马蹄形固定器固定头部，固定时先剪去两侧眼眶下部的皮毛，暴露颧骨突起，调节固定器两端的尖头金属棒，使其正好嵌在突起下方的凹陷处，然后在适当的高度固定金属棒（图11）。;5、家犬的抓取固定 经过驯服的家犬，例如Beagle犬，抓取是比较方便的。未经驯服的较凶恶的狗，要用特制的钳式长柄狗夹挟住狗颈部，将狗按倒在地，系上脖套和铁链条。急性实验用犬可将狗嘴绑住，再将其四肢固定好。 在给狗进行静脉给药或采血等操作时可用架式悬吊固定法或用箱式固定法。 箱式固定法类似家兔的盒式固定法，自制犬箱，将犬牵入，使犬不能回身，盖上箱盖前端卡住狗颈，使犬头露在箱外（卡颈处的箱盖和箱前端合拢后应为圆形，仅容犬颈存在，犬头不能缩回），犬即站立在犬箱内，犬箱的侧面可为栅栏式，可伸手随意牵出犬腿。 ;（二）编号和个体标记 动物实验中，为了区别和观察每一个动物，必须对动物进行标记和编号，要根据动物的种类、数量和实验时间的长短来选择合适的标记方法， 标记方法要保证号码耐久、清楚、简便、易认、适用。常用的方法有以下几种： 1、染色法：用毛笔或棉签蘸取化学药品在动物身体明显部位进行涂染。常用的染色剂有0.5%中性品红溶液（红色），3—5%苦味酸溶液（黄色），2%硝酸银溶液（咖啡色）和煤焦油溶液（黑色）。 染色法常用于实验同期短的实验，方法简单，动物无疼苦损害，但常因动物磨擦、舐毛， 尿、水浸、被毛脱落等而脱落，因此不适用长期的实验。 ; 2、挂牌法：用带号码的金属牌固定在动物的耳上或挂在脖颈