大黄素诱导人肝癌HepG2细胞线粒体凋亡作用研究.PDF

a bo 第QN卷 第R 期 OMNU年R 月 TTP 大黄素诱导人肝癌 edO 细胞线粒体凋亡作用研究 NI=OI=P OI=P OI=P OI=P OI=P OI=PG NG 熊思敏 ，张金晓 ，康 玮 ，王 磊 ，荆宝琴 ，张宗鹏 ，吕雄文 NK 安徽医科大学药学院， 安徽 合肥 OPMMPO OK 天津药物研究院新药评价有限公司，天津 PMMPMN PK 天津市新药非临床评价技术工程中心，天津 PMMPMN 摘 要：目的 研究大黄素对人肝癌eédO 细胞线粒体凋亡的影响。方法 培养人肝癌eédO 细胞，与R、NM、OM、QM、 SM、UM、NMMμäLi 的大黄素作用OQ、QU=Ü，jqp 法检测细胞增殖；QM、UM、NSMμäLi 大黄素作用eédO 细胞OQ=Ü，lLb_ 双荧光染色法观察细胞凋亡的形态学改变；á=sLmf 染色经流式细胞仪检测细胞凋亡；分光光度法检测~é~=P 活性； qm 试剂盒检测细胞qm 含量，不同荧光探针加载后流式细胞仪测定大黄素对eédO 细胞内活性氧（olp）含量、~OH浓 度、线粒体膜电位（jjm）变化的影响。结果 大黄素抑制eédO 细胞生长，且呈时间、浓度相关性，半数抑制浓度（fRM） 为（TTKQO±NKOR）μmäLi；随着大黄素浓度升高，lLb_ 双染观察到细胞核浓缩、碎裂、凋亡小体等凋亡形态；与对照组 比较，大黄素QM、UM、NSM μmäLi 作用于eédO 细胞OQ=Ü 后细胞凋亡率显著增加，~é~=P 活性显著增强，olp 水平、 ~O＋浓度明显增加（m＜MKMR、MKMN、MKMMN），UM、NSMμäLi 组线粒体膜电位明显降低，qm 含量显著下降（m＜MKMR、MKMN、 MKMMN）。结论 大黄素造成eédO 细胞内olp 堆积，qm 合成功能障碍，线粒体膜电位明显下降，进而诱导线粒体通透转 运孔开放，导致钙离子和细胞色素 外流，活化~é~ 蛋白家族，导致细胞凋亡。 关键词：大黄素；eédO 细胞；凋亡；线粒体膜电位；线粒体毒性；活性氧；~OH浓度 中图分类号：oVSOKO 文献标志码： 文章编号：NSTQJSPTS=EOMNUF=MRJ=MTTP=J=MT alfW NMKTRMNLKáKNSTQJSPTSKOMNUKMRKMNM b==~=~==~ ~~edO= NI=OIP OIP OIP OIP OIP OIP uflkd=páá Iwekd=gáá~ Ihkd=tá Itkd=iá Igfkd=_~èá I=wekd=wé I=i N uáï NKää==mÜ~~I=Üá=já~ä=rááI=eá=OPMMPOIÜá~ OK==a=b~ä~á=~=o~ÜI=qá~á=fá==mÜ~~á~ä=o~ÜI=qá~á=PMMPMNI=Üá~ PKqá~á=báá=o~Ü===a=mäáá~ä==qÜäI=qá~á=PMMPMNI=Üá~ ~~W=l q==Ü===á==áÜá~ä=~ééá=á=Ü~=Üé~äää~=~á~=ää=äá EeédOFK j eédO=ää=ï=~=ïáÜ=RI NMI OMI QMI SMI UMI=~ 100 μmol/L of emodin for 24 and 48 h, then the ~áJproliferative effect was assessed by MTS assay. HepG2 cells were treated with 40, 80, 160 μmol/L of emodin for 24 h, and ~Ü=ä=é=ï~=~ä=~äáÜX=qÜ=éÜäá~ä=Ü~==~ééá=ï===lLb_=ä=ä ~ááK=ééá=ï~===äï==EcjF=ïáÜ=á=sLmf=~ááK=~é~P=~áá=ï~== ééÜK=qm=~~=á=ï~====Ü===qmK=cäï==ï~===á=Ü=~OH ~áI=Ü===olpI=~=áÜá~ä=~=éá~ä=EjjmF =á=á=eédO=ää=~=ä~á=ïáÜ á=ä=éK o bá=ä=ááá~ä=áÜáá=Ü=éäá~á==eédO=ää=~=Ü