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微生物形态学检验 邱 宗 文 第三军医大学附属新桥医院 细菌的形态与结构 细菌基本形态有三种： ?球菌、杆菌、螺形菌 细菌基本结构包括： ?细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 细菌的特殊结构有： ?荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢 真菌的形态与结构 真菌形态有两种类型： 单细胞型：呈圆形或卵圆形，常见于酵母菌和酵母样菌 多细胞型：多呈丝状，分支交织成团、称为丝状菌，通称霉菌 真菌的基本结构： 菌丝—由孢子生出芽管，逐渐延长呈丝状 孢子—是真菌的生殖结构，真菌繁殖的微小单位 细菌形态学检查 不染色标本的检查： 主要用于检查细菌动力及运动状况，包括湿片法、悬滴法、毛细吸管法 染色标本的检查： 观察细菌形态、大小、排列、染色特性、以及荚膜、鞭毛、芽孢、异染颗粒等结构，有助于细菌的初步认识或诊断 细菌分离培养及鉴定 细菌分离培养：使细菌在平板上分散生长，便于观察菌落特征，也易于挑取单个菌落进行生化鉴定或血清学试验 细菌鉴定：形态与培养特性：形态、染色、培养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据 细菌形态与染色特点 染色性：革兰阳性、阴性，抗酸染色阳性、阴性等 形状、大小和排列：球菌、杆菌、螺形菌，菌体大小、单个、成双、短链、葡萄状等 细菌特殊结构：芽孢大小、位置、鞭毛数目及位置等 细菌培养特性 营养要求：简单或复杂 生长特性：快或慢 气体环境：需氧、兼性厌氧或厌氧 适宜生长温度：25℃、35-37℃、42℃ 菌落特征 大小：一般可分为大＞3mm、中2-3mm、小＜2mm 表面：光滑、粗糙、粘液样、皱纹、放射状、同心圆等 透明度：透明、半透明、不透明 外形：圆形、不规则等 高度：扁平、凸起、脐形等 边缘：整齐、锯齿状等 光泽：有光泽、无光泽等 色素：金黄色、白色、乳白色、绿色、紫色、黑色等 气味：酸味、生姜味、恶臭味 溶血性：完全溶血、不完全溶血、不溶血 革兰阳性球菌 Gram-positive cocci 基本特征：在血琼脂平板上生长，在麦康凯、伊红亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上不生长 基本鉴定试验要求： 触酶试验：任何阳球先做触酶试验，挑取菌落时不宜碰到血琼脂，因红细胞内含有过氧化物酶可致假阳性 凝固酶试验：是鉴定葡萄球菌的重要试验，少数金葡菌玻片法阴性，试管法阳性，是因该菌无结合凝固酶，有游离凝固酶；不能使用枸橼酸盐抗凝血浆，因有些细菌可分解枸橼酸盐致假阳性 Optochin试验：鉴别肺炎链球菌与甲型链球菌的重要试验 CAMP试验：鉴定B群链球菌 菌落特征：血平板上的溶血有助于一些细菌的初步鉴定，如金黄色葡萄球菌、链球菌属等 镜下形态：单个、成双矛头状、链状、四链状、葡萄状 根据菌落特征及镜下形态，结合一些基本试验可初步判断属于哪类细菌，再进一步做相应的生化试验即可确定细菌种属 金黄色葡萄球菌 S.aureus 形态与染色：阳性球菌、单个、双成、短链或不规则葡萄状排列 培养特性：在血平板上典型菌落为金黄色，周围有明显β溶血环，部分菌落也可以呈灰白色或柠檬色 化脓链球菌S.pyogenes 形态与染色：阳性球菌、固体培养基上呈单个或成双排列，较少呈链状，肉汤中呈长链状排列，脓液标本直接涂片呈单个、成双或短链状 培养特性：在血平板上形成较小、圆形、凸起、β溶血的灰白色菌落 肺炎链球菌S.pneumoniae 形态与染色：呈矛头状，成双或链状，有荚膜 培养特性：在5-10%二氧化碳环境中生长良好，血平板上形成细小、圆形、中央呈脐窝状，表面光滑、灰色、扁平，周围有草绿色溶血环，部分菌株与典型菌落不同，不是中央凹陷，而是湿润、透明的粘液样菌落 粪肠球菌 E.faecalis 形态与染色：阳性球菌、单个、成双或短链排列 培养特性：在血平板上形成较小、灰白色、湿润、凸起、有α或β溶血环的菌落，在麦康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落 脑膜炎奈瑟菌 N.meningitidis 形态与染色：阴性双球菌、肾形或咖啡豆状，常成双排列，凹面相对，在脑脊液直接涂片中常位于中性粒细胞内 培养特性：初次分离需在5-10%二氧化碳环境中生长，血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色的似露滴状菌落 淋病奈瑟菌 N.gonorrhoeae 形态与染色：阴双球菌、成双、肾形排列。生殖道分泌物直接涂片，急性期常位于白细胞内、慢性期位于白细胞外 培养特性：初次分离需在5-10%二氧化碳环境中生长，血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色菌落 白喉棒状菌 C.diphteriae 形态与染色：革兰阳性，细长微弯、菌体一端或两端粗大，呈棒状，排列不规则，菌体一端或两端可见异