发根农杆菌介导的怀地黄遗传转化研究-河南农业科学.PDFVIP

DOI牶牨牥牣牨牭牴牫牫牤j牣cnki牣牨牥牥牬牠牫牪牰牳牣牪牥牥牱牣牨牥牣牥牪牥 2007 年第10 期 1 2 1 1 1 1 * 付建喜, 范喜梅 , 周春娥 ,谷凤平 , 王　芳 , 周延清 (1. , 453007;2. , 454000) :利用发根农杆菌转化怀地黄组培苗子叶、叶柄和茎段,建立了有效的毛状根培养及 植株再 生体系。毛状根可直接从受伤的外植体产生, 能在无外源激素的1/2MS 固体和液体培养基上自 主生长, 表现出典型的发根特征。毛状根在附加0. 2 mg /L K T 和 3. 0 mg /L 6 - BA 的 1/2 MS 培 养基上能 100%形成愈伤组织, 51. 49%分化出芽;分化芽在 1/2 MS 培养基上100%生根, 形成具 有矮化、节间短和根系发达等特征的转化再生植株且移栽后生长旺盛。ro lB 基因PC R 和冠瘿碱 纸电泳检测证明, 农杆菌 Ri 质粒上的 T - DNA 整合到怀地黄基因组中并表达, 获得转基因 怀地黄。 :怀地黄;毛状根;植株再生;冠瘿碱纸电泳;PCR :S567. 9 　　:A 　　:1004 3268(2007)10 0072 05 A g robacteri um R h iz ogenes-medi ted T r nsform tion of R ehmann ia g lu tinosa Libosch. f . hueich ingens is (Ch n et Schih)Hsi o 1 2 1 1 1 1 * FU Ji n-xi , FAN X-i mei ,ZHOU Chun-e ,GU Feng-ping ,WANG F ng ,ZHO U Y n-qing (1. College of Life Sciences, Hen n Norm l University, Xinxi ng 453007, Chin ; 2. Ji ozuo T e cher’ s College, Ji ozuo 454000, Chin ) Abstract:An efficient sy stem of genetic tr nsform tion nd pl nt regener tion w s est blished in R ehmanni a g lu tinosa Libosch. f . hueich ing ensis (Ch n et Schih )Hsi o by infecting the fr g- ments of le ves, stems nd petioles of young regener ted pl ntlets with A g robact er ium rh iz o- g enes str in 15834. H iry roots w ere produced directly from the w ounded surf ce of the expl nts on hormone-free M ur shige nd Skoog (MS )medium fter infection by A . rh iz ogenes. Tr ns- formed roots grew r pidly on both solid nd liquid 1/2M S medium, nd exhibited typic l h iry root phen