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冬枣试管苗生根及去琼脂培养的研究
冬枣试管苗生根及去琼脂培养的研究
【摘要】:以枣改良培养基为基本培养基,分别附加0.3、0.35、0.4、0.45、0.5mg/l的IBA对冬枣试管苗进行生根培养。其结果与以前的研究不一致,表明IBA对冬枣试管苗的生根效果尚不稳定。分别采用蛭石、珍珠岩、土等无机基质取代琼脂作培养基支撑物,对冬枣试管苗进行生根培养。结果表明,以土做支撑物的效果较好,虽然地上部显著低于对照,但发根率及根长与对照无明显差异。
【关键词】:冬枣;试管苗;生根;无机支撑物
中图分类号:S 文献标识码:B 文章编号:1002-6908(2007)0910031-02
从上世纪40年代,植物组织培养就成为植物科学的一个活跃的研究领域。通过茎尖培养获得再生植株的植物种类从上世纪60年代以来迅速增加。
冬枣鼠李科枣属,是鲁北地区优良的晚熟鲜食枣品种。冬枣又名冻枣,苹果枣,平均单果重13.3克,最大果重37.3克果实近圆形,果形指数近1,果肉较厚,乳白色,肉质细腻多汁,味美清香,略具酸味,可溶性固形物35-38%,核较大纺锤形,常有1-2枚饱满种红,肉核比20.51∶1[1]冬枣营养丰富含天门冬氨酸,苏氨酸,丝氨酸等多种人体必须的氨基酸,总量为9085mg/kg,含蛋白质1.65%总糖量17.3%总黄酮含量1.1mg/kg,其维生素b11mg/kg维生素b22.2mg/kg其维生素c含量达3030mg/kg是苹果的70倍,梨的100倍,有活维生素丸和百果之王之称,此外,冬枣还含有丰富的KCaFeZnCu等元素对预防心血管疾病,防癌有特殊功效,是一种具有保健作用的鲜食品种,是退耕还林,改善生态环境,开发是扶贫及种植结构调整实现产业化的理想种植树种,尤其在加入WTO更成为出口创汇的优势品种发展潜力巨大。
冬枣苗木生产目前已嫁接为主速度较慢,制约了冬枣的发展,而利用组织培养快繁技术大量生产冬枣,尤其是无毒冬枣苗木具有重大意义。关于枣树组织培养快速繁殖技术的研究已有很多报道[2], 1955年张福泉等研究了鸣山大枣试管苗继代繁殖中6-BA,IBA和IAA三种激素的最优激素组合[3]。同年朱文勇认为对枣试管苗生长分化影响的分生激素的IBA0.3-0.5mg/kg细胞分裂素6-BA1-1.5mg/l为宜,枣试管苗在分生分化中温度25-27℃为宜,外植体茎段比茎端好[4]。1996年金芳采用5种培养基进行了枣试管苗培养实验[5]。1997年山西省果树研究所杜学梅,郭黄萍等在1993-1994年进行了枣试管苗生根及移栽技术研究,旨在通过探索影响枣试管苗生根的主要因素,提高试管苗的生根率和生根移栽成活率,培养优质苗木[6]。1998年王嘉长等研究NG枣试管苗继代培养中的效应。
1. A材料与方法
在春季枣树萌发后采当年生枣头,先用洗衣粉清洗茎段后在70%酒精中浸泡20-30秒,再放入0.1%升汞中消毒浸泡8-10分钟用无菌水冲洗,剪成单节茎段在无菌条件下接入培养基进行继代培养,其后进行继代培养。以继代培养6代的冬枣试管苗为试材进行下几方面的试验。
1.1冬枣生根培养基中适宜IBA浓度的筛选
以冬枣培养基为基本培养基,在培养基中分别加入浓度为0.3mg/l、.035 mg/l、.0.4 mg/l、.0.45 mg/l、0.5 mg/l的IBA,常规灭菌后接种长1-1.5cm冬枣试管苗茎段4根,每处理6瓶并于培养室培养。培养条件:温度为26-30Co 平均温度,光照条件为3000-4000lux每天光照14小时,培养30天调查不同激素处理的试管苗新生茎段长,单株根长和生根率,分析比较个处理试管苗生长状况。
1.2以蛭石、珍珠岩为培养基支撑物对冬枣试管苗生长影响的研究
选用200ml大口玻璃瓶,以附加IBA0.5 mg/l为基本培养基进行以下处理:
1.2.1以蛭石作为培养基支撑物并与培养基同时灭菌(简称蛭石支撑,同时灭菌)
在大口瓶里放入50ml蛭石,在加入不含琼脂的基本培养基35ml,用双层聚丙烯膜封口后,常规灭菌后接种。
1.2.2以蛭石作为培养基支撑物并与培养基分开灭菌(简称蛭石支撑,分开灭菌)
在大口瓶内放入50ml蛭石后封口灭菌,超净台上把经过常规灭菌的不含琼脂的培养基35ml倒入培养瓶内蛭石中然后接种。
1.2.3以珍珠岩作为培养基支撑物并与培养基同时灭菌(简称珍珠岩支撑,同时灭菌)
在大口瓶里放入50ml珍珠岩,在加入不含琼脂的基本培养基35ml,用双层聚丙烯膜封口后,常规灭菌后接种。
1.2.4以珍珠岩作为培养基支撑物并与培养基分开灭菌(简称珍珠岩支撑,分开灭菌)
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