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含油污泥微生物破乳脱油的研究 　　【摘要】本文是利用微生物分离含油污泥的油、泥（微生物破乳）和降解污泥中的污染物。经过了微生物应用菌株的分离、筛选和诱导培养，得到具有油泥分离和污染物降解性能的5株应用菌株，分别鉴定为假单胞杆菌和芽孢杆菌。利用已选育的微生物菌株对含油污泥经厌氧处理后再利用好氧处理方式进行脱油实验，对分离的原油进行回收。含油23000mg/kg的含油污泥在4小时内脱油到10100mg/kg，脱油率到55.8%。微生物降解实验中，处理效果比较明显，且随着时间的延长，油去除率越高，当处理时间为60天时处理接近达到排放标准。经微生物脱油和生物降解处理，使污泥达到排放标准，不再污染人类赖以生存的环境。 　　【关键词】微生物破乳;含油污泥;微生物降解;脱油 　　 　　0.前言 　　目前我国油田开采均采用早期注水保持地层压力的方法。随着油田的深度开采,采出原油中的含泥水量越来越高[1]。有统计资料报道，油田外排含油污泥总量每年达30万吨，含油污泥主要来自接转站、联合站的油罐、沉降罐、污水罐、隔油池的底泥、作业、管线穿孔而产生的落地原油及含油污泥［2］。污泥含油量在10%-30%之间，按平均含油20%计，每年约有4万吨原油沉积在油泥中，且含油污泥体积庞大，如果不处理将会随雨水的流动污染土壤，含油废弃物的处理是石油工业环境保护的一大难题。近年来,含油污泥的处理倍受关注,国外普遍采用[3～5]填埋、分散施耕、集中干燥焚烧、微生物处理、化学固化处理、化学氧化降解、化学溶剂清洗、混凝法固液分离等方法,但都存在着成本高,易造成二次污染。含油污泥既是油田生产过程中产生的废弃物，同时也是一种资源。如果能找出一种经济实用的方法对含油污泥进行无害化处理和残油回收，不仅会产生一定的经济效益，而且会减轻污染，产生巨大的环境效益和社会效益。由于生物处理法具有节约能源、投资少、运行费用低等优点,目前受到国内外环保产业界人士普遍关注和重视。 　　本研究主要是利用微生物分离含油污泥的油、泥（微生物破乳）和降解污泥中的污染物。经过了微生物应用菌株的分离、筛选和诱导培养，得到具有油泥分离和污染物降解性能的菌株，利用已选育的微生物菌株对含油污泥经厌氧处理后再利用好氧处理方式进行脱油实验，对分离的原油进行回收。经微生物脱油和生物降解处理，使污泥达到排放标准，不再污染人类赖以生存的环境。 　　1.材料和方法 　　1.1 污泥分析 　　 对含油污泥进行含油、含水（重量法）、色度、微生物、钙镁化合物分析。 　　1.1.1含油污泥含水率的测定 　　称取一定量的含油污泥，于70℃干燥箱中烘干2小时，余样称重。 　　含水率=（原始油泥湿重-干燥后样品重）/原始油泥湿重×100% 　　1.1.2含油率的测定 　　取适量待测油泥样置于三角瓶中，加入15ml0.01mol/LCaCL2，15ml石油醚，混匀，振荡1-2分钟，静置1小时，将样液移入离心管离心（2000转/分）20分钟，液层倾入分液漏斗，用石油醚萃取三次，用水洗2-3次，过滤，醚层入恒重干烧杯，于60℃水浴锅上水浴加热直至石油醚挥发完毕，擦去外壁水汽，放置于70℃干燥箱中烘干4小时，去除水分，干燥后样品称重，计算样品干重含油率和含油量。 　　样品干重含油率=W3/（W2-W2×A%）×100% 　　样品干重含油量（mg/kg）=W3/（W2-W2×A%）×106 　　其中W3―干燥后样品重,W2―原始油泥湿重，A%―原始油泥含水率 　　1.2 菌种及培养 　　1.2.1油泥破乳菌、石油类降解菌菌种来源从长期被石油污染的土壤中分离筛选获得。 　　1.2.2 培养基: (1)富集培养基(g/L)。蛋白胨,1.0g；葡萄糖,5.0g；K2HPO4,1.0g；KH2PO4,1.0g；NaCl,5.0g；原油，10g；pH7.0～7.2。(2) 筛选和生长培养基(g/L)。K2HPO4,0.5g； KH2PO4,0.5g；MgSO4?7H2O,0.2g；CaCl2,0.1g；NaCl,0.2g； MnSO4?H2O,痕量；10%FeCl2溶液1滴； NH4NO3,1.0g；原油, 5g, 10g, 20g, 50g, 100g, pH7.0～7.2。 (3) 细菌适应温度、酸碱度生长量测定。分别在25℃，27℃，28℃，30℃，35℃下和pH为6.5，6.8，7.0，7.5，8.0的情况下在500mL三角瓶中于165r/min的摇床中培养。在752C型紫外可见分光光度计在650nm下测定培养液的OD650值,用以表示细菌生长的相对量，来确定菌种的最佳生长温度和pH值。每一组做三次重复。 　　1.3微生物破乳、降解能力的测定 　　1.3.1微生物破乳能力的测定 　　利用郝现联合站罐底