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响应曲面法优化微波辅助提取茶多酚工艺的研究 　　摘要：试验采用微波法辅助提取茶多酚。在单因素试验基础上，通过响应曲面法优化提取条件，建立多元二次回归方程模型。结果表明，乙醇体积分数、料液比等因素对茶多酚得率的影响不是简单的线性关系。在原料粒度为80目，微波功率为300 W时，当乙醇体积分数为81.27%、料液比（g/mL）1∶35.47、提取温度70 ℃、提取时间3 min时，茶多酚得率为16.169%，测验值与理论值接近，模型预测可靠。 　　关键词：茶多酚；微波法；响应曲面法 　　中图分类号：TQ914.1；TS202.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）03-0631-04 　　茶树（Camellia sinensis）在中国的种植范围大，有着丰富的自然资源。茶树树叶含具保健、药效功能的茶多酚和咖啡因，其中茶多酚是茶树树叶中多酚类化合物的总称。茶多酚化学结构中带有多个活性羟基，研究表明茶多酚具有抗氧化、防癌、抗癌、抗辐射、抗衰老、预防心血管疾病、降低血糖和血脂等多种生理活性[1]，因此在食品、油脂、医药、日化、精细化工等领域有着广泛的应用。 　　目前，国内外茶多酚产品的提取方法主要有溶剂提取法、离子沉淀法、树脂吸附分离法等方法。传统的方法均存在提取率低，产品具有潜在危害等缺点[2]。微波法辅助提取技术是近年来发展起来的一种新方法，具有快速、高效、安全、节能等优点。近年来，微波萃取技术在天然产物中化学成分的提取方面取得了较大的进展，广泛用于挥发油、苷类、多糖、萜类、生物碱、黄酮、单宁、甾体等天然化合物的提取[3]。 　　本试验以茶树树叶为原料，加以微波法辅助提取茶多酚，结合单因素试验，利用响应曲面法设计优化微波法辅助提取茶多酚的工艺条件，为茶树树叶利用与深加工提供一定的依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　茶树树叶，采自南京市江宁区方山茶场。 　　1.2 微波法辅助提取茶多酚工艺 　　称取一定粉碎粒度的茶树树叶约1.0 g，按料液比（g/mL，下同）1∶35加入体积分数为80%的乙醇溶液于微波专用的三颈烧瓶中，置于微波反应器内，调节微波时间为3 min、微波温度为65 ℃、微波功率为300 W进行萃取。将萃取液趁热过滤，在3 000 r/min下离心10 min，量取上清液体积。 　　1.3 茶多酚含量的测定 　　浸提液中茶多酚含量的测定参照文献[4]采用酒石酸亚铁比色法进行。 　　1.4 单因素试验 　　依次改变原料粒度、乙醇体积分数、料液比、微波时间、微波提取温度5个因素，分别考察其对茶多酚得率的影响。 　　1.5 响应曲面法优化茶多酚提取工艺试验 　　根据单因素试验结果，筛选出液料比、提取温度、微波时间、乙醇体积分数4个因素，采用Design-expert V8.0进行试验设计和分析。其因素与水平如表1所示。 　　2 结果与分析 　　2.1 单因素试验结果 　　2.1.1 原料粒度对茶多酚得率的影响 由图1可知，随着原料粒度的增加，茶多酚得率逐渐增加，当原料粒度超过80目后，茶多酚得率略有下降，故原料粒度以80目为宜。 　　2.1.2 乙醇体积分数对茶多酚得率的影响 由图2可知，随着已醇体积分数的提高，茶多酚得率先增加后降低，当乙醇体积分数为80%时达到最大。表明乙醇体积分数的改变可导致提取液极性的改变，从而影响提取效果。 　　2.1.3 料液比对茶多酚得率的影响 由图3可知，随着溶剂比例的增加，茶多酚得率先增加后降低，当料液比为1∶35时达到最大。说明溶剂量的增加有助于扩散过程的进行，但当溶剂量过大时，微波的热效应、空化效应等强度减弱[5]，影响了提取的效果。 　　2.1.4 微波时间对茶多酚得率的影响 由图4可知，随着提取时间的延长，茶多酚得率先增加后降低，在3 min时达到最大。 　　2.1.5 提取温度对茶多酚得率的影响 由图5可知，温度的升高有助于茶多酚的提取，当提取温度为70 ℃时茶多酚的得率最高，继续提高温度则茶多酚被氧化而不利于其得率的提高。 　　2.2 响应曲面法对茶多酚提取工艺的优化 　　试验运用Design-expert V8.0软件生成了29个试验点，在各自的试验条件下得到的相应茶多酚得率见表2。 　　2.2.1 模型方差分析 对表2数据运用 Design-expert V8.0软件进行模型选定与方差分析，结果见表3、表4。 　　P（概率F值）如果小于0.05，说明对应的因素对响应值影响显著，本试验中由于所选择模型显著，失拟项不显著，表明所选择的模型可靠。从表3可以看出诸因素的影响不是简单的线性关系，从单因素来看B和D对茶多酚得率的影响显著，其次为C，最后为A。在4个因素的交互作用下，对茶多酚得率的影响